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目的：脑膜癌病(meningeal carcinomatosis, MC)是全身恶性肿瘤细胞通过血液、神经周围淋巴管等向脑膜、脊膜、蛛网膜下腔局灶性或弥漫性转移、浸润的一种破坏性并发症。脑膜癌病的临床表现复杂多样、影像学表现非特异性，导致脑膜癌病的诊断困难。其诊断的主要方法是脑脊液（CSF）细胞形态学，其敏感性约为50%。免疫细胞化学染色背景清晰，易识别肿瘤细胞，标本易保存。近年来提出使用免疫细胞化学提高诊断的敏感性及提示原发灶。目前为止，对于实体瘤转移MC患者较好的治疗方案为鞘内注射甲氨蝶呤。监测治疗效果的方法有监测患者的临床神经功能及CSF细胞学，监测CSF中肿瘤标记物水平变化等。本实验选用CK（广谱细胞角蛋白，不包括CK7）、CK7（细胞角蛋白7）、PLUNC（腭鼻肺特异性蛋白）分别对人脑脊液进行免疫细胞化学法检测其在脑脊液肿瘤细胞的表达，了解三种蛋白在提高MC诊断敏感性和特异性及提示原发灶方面的价值；并使用酶联免疫测定法（ELISA法）观察CK、PLUNC两种蛋白在CSF中的表达水平及治疗前后的水平变化，联合患者症状、CSF常规、细胞学变化，提出监测治疗效果及提示治疗预后的可靠指标。方法：实验对象为河北医科大学第二医院神经内科2010年3月至2012年12月确诊的脑膜癌病患者58例，原发灶为肺癌的有25例，贲门癌有3例，胃癌有7例，乳腺癌5例，生殖器肿瘤2例，原发灶不详16例；其中接受鞘内注射甲氨蝶呤治疗的患者并符合本实验条件的患者6例；同时设阴性对照：中枢神经系统白血病患者15例，非脑膜癌病患者30例。将实验对象行腰椎穿刺术后留取脑脊液约6ml，使用ShandonCytospin4玻片离心机离心，收集单层脑脊液细胞玻片4张，分别进行MGG（May-Gruwald-Giemsa）染色及CK、CK7、PLUNC免疫细胞化学染色，置于普通光学显微镜下观察结果。另留取脑脊液约1.5ml进行ELISA双抗体夹心法分别检测脑脊液中CK、PLUNC蛋白在CSF中的表达含量及检测治疗前、治疗后含量变化，对蛋白水平进行结果分析。结果：1.58例MC患者中CK阳性率为84.48%，CK7阳性率为56.90%，PLUNC阳性率为44.83%，三者联合检测阳性率为91.38%。45例对照组中有1例白血病CK染色阳性余对照组均为阴性，CK、CK7、PLUNC三种抗体对诊断MC的敏感性分别为84.48%、56.90%、44.83%，特异性分别为97.5%、100%、100%。其中25例肺癌组中22例CK阳性，阳性率为88%，16例CK7阳性，阳性率为64.00%，17例PLUNC阳性，阳性率为68%；10例胃贲门癌中8例CK阳性，阳性率为80%，4例CK7阳性，阳性率为40%，1例PLUNC阳性，阳性率10%；7例乳腺+生殖系统癌中6例CK阳性，阳性率为85.71%，4例CK7阳性，阳性率为57.14%，2例PLUNC阳性，阳性率为28.57%；16例原发灶不详中13例CK阳性，阳性率为81.25%，9例CK7阳性，阳性率为56.26%，6例PLUNC阳性，阳性率37.5%。经统计学比较CK、CK7在四种原发灶中表达无显著性差异，PLUNC的表达有差异（P<0.05），其中PLUNC在肺癌组与其余三组中的表达有显著性差异，而其余三组之间无显著性差异，PLUNC对诊断MC原发灶为肺癌的敏感性为68%，特异性为72.73%。2.脑脊液中CK及PLUNC测定。58例MC组中鞘内注射前的脑脊液中CK平均水平为0.984±0.323ng/ml，30例非脑膜癌病组CK平均水平为0.148±0.072ng/ml，两者比较有显著性差异。其中，肺癌MC组CK平均水平为0.928±0.313ng/ml，胃贲门癌MC组平均水平为0.910±0.164ng/ml，乳腺+生殖系统癌MC组平均水平为1.172±0.217ng/ml，原发灶不详MC组平均水平为1.056±0.437ng/ml，四组比较无显著性差异。58例MC鞘内注射前CSF中PLUNC平均水平为2.058±0.629ng/ml，30例非脑膜癌病组平均水平为1.149±0.321ng/ml，两者比较有显著性差异。其中肺癌MC组平均水平为2.503±0.482ng/ml，胃贲门癌MC组平均水平为1.614±0.226ng/ml，乳腺+生殖系统MC组平均水平为1.517±0.518ng/ml，原发灶不详MC组平均水平为1.827±0.617ng/ml，四组比较有显著性差异。其中，肺癌MC组与其他三组比较有显著性差异。胃贲门癌、乳腺生殖系统癌、原发灶不详MC三组比较无显著性差异。9例接受鞘内化疗的MC患者中免疫细胞化学染色符合本实验条件6例，5例原发灶为肺癌，1例原发灶不详，6例CK阳性，5例PLUNC阳性。6例MC患者3例症状好转，同时患者的生存期明显延长，CSF中肿瘤细胞为散在、治疗后数目明显减少，颅压、CSF葡萄糖、蛋白、CK、PLUNC水平随治疗逐渐下降；1例症状持续存在，患者的生存期约为3周，CSF中肿瘤细胞为散在，治疗后数目无变化，颅压、CSF蛋白逐渐升高，CSF葡萄糖、PLUNC水平轻度降低，CK上下波动；2例症状恶化，同时生存期较短，CSF中肿瘤细胞分别为多个及满视野，治疗前后未见明显变化，CSF中CK水平逐渐升高，CSF中PLUNC仅1例阳性，水平轻度降低，而颅压、CSF葡萄糖、蛋白上下波动。3例症状好转患者治疗前颅压<250mmH2O，CSF中葡萄糖水平>2.5mmol/L，患者的治疗后预后与CSF中蛋白、CK、PLUNC的关系较小。结论：1. CK、CK7、PLUNC三者免疫细胞化学检测可用于诊断MC，三者的敏感性分别为84.48%、56.90%、44.83%，特异性分别为97.5%、100%、100%。2. CSF免疫细胞化学PLUNC染色阳性、ELISA法检测PLUNC水平升高提示MC的原发灶为肺癌的可能性较大，其中免疫细胞化学染色对诊断MC的原发灶为肺癌的敏感性为68%，特异性分别为72.73%。3.监测CSF中CK、PLUNC结合症状、肿瘤细胞数目的动态变化对监测治疗效果具有重要意义。4.MC患者CSF肿瘤细胞数目为散在、葡萄糖水平>2.5mmol/L、首次腰穿颅压<250mmH2O提示患者治疗的预后较好。