清热活血配伍对糖尿病ApoE基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化的影响

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研究背景:糖尿病是一种慢性代谢紊乱疾病,现已成为第三大严重威胁人类健康的慢性非传染性疾病。近年来,糖尿病的发病率逐年上升,而与非糖尿病人群相比,糖尿病人群中动脉粥样硬化性疾病的患病率高、发病年龄较轻、病情进展较快,多脏器同时受累较多。此外,动脉粥样硬化引发的心脑血管疾病是糖尿病患者致死致残的主要原因之一。大量研究证实,糖尿病早期即存在动脉粥样硬化,二者关系密切。近期研究发现慢性炎症反应是导致和促进糖尿病动脉粥样硬化的重要因素之一,而中医理论认为痰饮、瘀血是低度炎症的主要病理产物,痰瘀互结是低度炎症的基本病理特征,因此我们选择清热活血配伍中药对糖尿病Apo E基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化炎症反应的影响进行研究,为中医药治疗糖尿病冠状动脉粥样硬化提供科学依据与新思路。目的:通过观察清热活血配伍中药对糖尿病Apo E基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化炎症反应的影响,为临床使用中医药治疗糖尿病冠状动脉粥样硬化提供科学依据与新思路。方法:Apo E基因敲除小鼠自8周龄时予以高脂饮食,并予以链脲佐菌素腹腔注射制造糖尿病模型(40只),造模后随机分为清热活血配伍中药组(20只)和空白对照组(20只)。自13周始给药,分别给予清热活血配伍中药0.9g/kg·d和生理盐水lOmg/kg·d灌胃,给药16周后测定血糖、血胆固醇及血清糖基化终产物(AGEs)水平,评估冠状动脉主干的病理形态学改变,天狼猩红染色方法测定冠状动脉胶原含量,HE染色观察冠状动脉开口处的管腔狭窄百分率、管腔闭塞的发生率及冠状动脉周围的炎症浸润程度,免疫组化法测定斑块中单核细胞/巨噬细胞-2(MOMA-2)的表达、ELISA方法测定血浆中ICAM-1表达、Real-time PCR的方法测定ICAM-1、MCP-1、HO-1的表达。结果:清热活血配伍中药组与对照组相比,冠状动脉开口处狭窄率(37.3%±3.87%,43.1%±4.99%)、冠状动脉开口处闭塞率(17.2%±1.00%,29.3±0.73%)、冠状动脉周围炎症细胞密度(17.9%±1.97%,26.1%±2.77%)、MOMA-2含量(29.09%±3.12%,58.06%±5.49%)、冠状动脉胶原含量(5.23%±0.63%,13.77%±1.05%)均有显著差异(P<0.01);此外,清热活血配伍中药组小鼠15周后的空腹血糖水平、血清糖基化终产物水平与对照组比较也有显著下降(P<0.05);清热活血配伍中药还显著降低ICAM-1、MCP-1基因表达(P<0.05),并显著升高HO-1mRNA的表达(P<0.01)。结论:清热活血配伍中药可以显著抑制糖尿病动脉粥样硬化小鼠冠状动脉血管内、外膜的炎症反应及炎性因子的表达,降低冠脉主干的狭窄及闭塞率,减缓冠状动脉粥样硬化的进展。
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