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目的：由于目前国内外建立的IgA肾病模型十分不稳定，本研究利用分子生物学的方法，根据国外文献提供的与IgA肾病相关的金黄色葡萄球菌细胞膜抗原决定簇，用表达含有该抗原决定簇的融合蛋白建立动物模型；本研究选择了其中的人巨细胞病毒、腺病毒和乙型肝炎病毒，探讨上述三种病原微生物在IgA肾病发生、发展中的作用；为探讨细胞因子在IgA肾病间质损伤中的作用机制、判断IgA肾病进展程度及预后，本实验对IgA肾病肾活检组织进行了β1型转化生长因子(TGFβ1)，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，结缔组织生长因子(CTGF)和骨形态蛋白7(BMP-7)的检测。
材料和方法：①本实验利用文献提供的抗原决定簇蛋白序列合成相应的基因片段，将此片段与HindⅢ和SnaBⅠ双酶切后的载体pMAL-c2G相连接，验证重组后的质粒，将重组质粒导入表达菌中进行融合蛋白的表达，亲和层析纯化融合蛋白；用纯化的蛋白进行多克隆抗体的制作，进一步透析纯化和亲和层析多克隆抗体；利用此抗体进行IgA肾病和非IgA肾病肾活检组织的免疫组织化学检测；利用此融合蛋白免疫Balb/c小鼠，制作动物模型。②血清HBV抗原阴性IgA肾病96例和非IgA肾病80例(系膜增生性肾小球肾炎、膜增生性肾小球肾炎、膜性肾病和局灶性节段性肾小球肾炎各20例)，进行HCMV、AV免疫组化检测，在上述组织的基础上加上20例血清HBV阳性的IgA肾病进行HbsAg和HbcAg的免疫组化检测。③用上述的96例IgA肾病、80例非IgA肾病组织进行TGFβ1、bFGF、CTGF和BMP-7检测。
结果：①目的基因与载体连接成功，表达融合蛋白；多克隆抗体检测结果发现，在IgA肾病患者组织中该抗原大部分表达在肾小管上皮细胞内，而在非IgA肾病患者中仅为微量表达，但其表达率不与肾小管间质和肾小球的损伤相关；动物模型的病理学表现和临床指标与人IgA肾病相似，动物模型制作成功。②HCMV和AV在IgA肾病中的表达明显强于其他类型的原发性肾小球肾炎；主要表达在肾小管上皮细胞和肾小球系膜区，在间质中的表达也较高，只有HCMV的表达强度与肾小球的损伤程度呈正相关；HbsAg和HbcAg在IgA肾病中的表达明显强于在其他类型的原发性肾小球肾炎；在血清HBV抗原阳性和阴性的IgA肾病中HbsAg和HbcAg表达率没有显著性差异，HbsAg主要表达在肾小管上皮细胞内，少量累及在肾小球和肾间质；HbcAg除了在肾小球有明显的表达和肾间质外，在肾小管上皮细胞内有更高的表达，HbcAg的表达强度与肾小管间质损伤程度呈正相关。③TGF-β1、bFGF、CTGF和BMP-7在IgA肾病中的表达率均很高(＞80％)，四种细胞因子主要表达在肾小管上皮细胞中、间质成纤维细胞胞浆中、系膜区和炎症细胞大量浸润区；肾小管间质损伤程度与TGF-β1、bFGF和CTGF的表达强度呈正相关，BMP-7的表达强度与肾小管间质的损伤程度无关。
结论：①金黄色葡萄球菌细胞膜20肽抗原决定簇与IgA肾病的发生密切相关；用此融合蛋白制作IgA肾病动物模型更接近于人IgA肾病，建立了稳定的IgA肾病动物模型。②HCMV和AV感染与IgA肾病的发病密切相关；HCMV参与IgA肾病的肾小球损伤过程；HbsAg和HbcAg在血清HBV阴性和阳性的IgA肾病组织表达率没有差异，但明显强于其他类型的肾小球肾炎。提示HBV可能以抗原的形式参与IgA肾病的发生和进展，HbcAg参与肾小管间质的损伤。在血清阴性和阳性的组织中没有明显的差异的原因可能是临床检测的敏感性问题或是免疫逃避的问题。③TGF-β1、bFGF和CTGF的表达强度与肾小管间质的损伤程度升高而增重，提示三种细胞因子参与IgA肾病的进展和预后；BMP-7在IgA肾病中不是通过单纯拮抗TGFβ1的作用而发挥其保护作用。