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目的:本实验通过将大鼠自体微栓颗粒栓塞冠脉微血管建立微循环障碍的模型,模拟临床患者发作心绞痛而大冠脉无有意义狭窄的情况;观察不同时期缺血心肌中fgl2凝血酶原酶(fgl2)、血管性血友病因子(vWF)的表达,探讨冠脉微栓子阻塞微血管后微循环障碍的可能发生机制;同期观察缺氧诱导因子-1α(HIF1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及心肌毛细血管密度的变化,探讨局部缺氧刺激对促发心肌侧枝循环形成和建立的影响。方法:SD大鼠随机分为自体血栓组、生理盐水组和正常对照组。取鼠尾血制作自体微栓颗粒,通过主动脉根部注入自体微栓颗粒悬液建立冠脉微循环障碍模型。于术后1h、24h、1w、2w、3w和4w取老鼠心室组织标本,HE染色、光镜下观察心内膜下冠脉微血管血栓形成情况,判断模型建立是否成功;酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测血清中vWF含量;RT-PCR检测缺血心肌中fgl2mRNA及HIF1αmRNA的表达;并通过免疫组化检测HIF1α、VEGF蛋白表达情况及心肌毛细血管密度的变化。结果:(1)病理结果显示冠脉微血栓模型建立成功,光镜下观察心肌小动脉、小静脉及毛细血管中可见混合血栓或白色血栓的存在,自体血栓组老鼠冠脉微循环内微栓子的数量明显较生理盐水和正常对照组多,且有统计学意义。(2)冠脉微栓塞后1h时缺血心肌组织fgl2mRNA的表达达高峰,后1w、2w、3w、4w时表达明显下降,但仍有持续表达,且与血清中vWF含量变化高度相关。(3)冠脉微栓塞后1h、24h时缺血心肌组织HIF1αmRNA呈阳性表达,且同期HIF1α蛋白亦呈阳性表达,主要位于心肌细胞核中。(4)冠脉微栓塞后VEGF蛋白表达在第2w、第3w时增加明显,第4w时下降至正常水平的阳性表达,其分布于心肌细胞、动脉平滑肌细胞、血管内皮细胞胞浆,且以后者为主。(5)冠脉微栓塞后第2w、第3w时心肌毛细血管密度明显增加,第4w时下降至正常水平。结论:①冠脉自体微血栓模型的成功建立为以后研究微循环障碍机制提供一个经济、方便且有效可行的实验平台。②fgl2mRNA表达阳性提示其可能参与冠脉微血栓的形成,可能是发生冠脉原位血栓的机制之一,为进一步探讨fgl2在冠脉微血栓中的作用提供一个实验基础。同期的vWF血浆含量变化提示在微循环障碍的发生机制可能存在因内皮损伤触发的经典内源性凝血途径因素参与。③缺血心肌中HIF1α和其下游基因VEGF的表达增加,及相应心肌毛细血管密度明显增加,提示冠脉微血栓形成后引起冠脉微循环障碍,低氧刺激信号触发HIF1α转录并上调VEGF表达,促进血管内皮细胞增殖和分裂,增加侧枝循环的形成,使心肌微血管密度增加从而改善心肌供血和心功能。