目的:通过研究小鼠给抗结核药物引起肝毒性的胆汁酸谱变化,探讨法尼醇X受体(Farnesoid X receptor,FXR)-胆汁酸介导的抗结核药物肝毒性的可能机制,为临床合理使用抗结核药物及预防肝损伤提供依据。方法:1.靶向代谢组学:建立小鼠血清中19种胆汁酸浓度的LC-MS/MS检测方法,采用岛津LC-30A液相系统串联AB SCIEX QUAD 5500质谱仪,CORTECS UPLC(?)HSS T3(2.1×100mm,1.6μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(含6mM乙酸铵)为A相,95%乙腈为B相进行梯度洗脱,质谱使用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,对小鼠血清中的胆汁酸谱进行测定;2.动物肝损伤模型分组及化学干预:野生型小鼠(C57BL/6小鼠)随机分成5组(每组 6 只):空白对照组(0.5%CMC-Na)、Rifampin 组(RIF,120 mg·kg-1)、Isoniazid 组(INH,60 mg·kg-1)、Pyrazinamide 组(PZA,300 mg·kg-1)、HRZ 组(120 mg·kg-1 RIF+60mg·kg-1 INH+300mg·kg-1 PZA),收集小鼠血清及肝组织;并采用FXR敲除小鼠(FXR-/-小鼠)及奥贝胆酸(Obeticholic acid,OCA)干预措施,观察C57BL/6、FXR-/-小鼠(每组6只)给予HRZ、HRZ+OCA后代谢物及组织损伤变化;3.肝损伤指标检测:小鼠血清检测生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)及总胆酸(TBA),观察肝功能变化;取小鼠肝脏进行HE染色,观察肝组织状态变化;4.基因及蛋白表达:通过RT-qPCR检测小鼠肝组织FXR、小分子伴侣(Small heterodiner partner,SHP)、胆固醇 7α-羟化酶(Cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)基因表达水平,western blot检测小鼠肝组织FXR蛋白表达水平;结果:1.建立了小鼠血清中19种胆汁酸浓度的LC-MS/MS检测方法,选取的高浓度胆汁酸4～4000 ng·mL-1低浓度胆汁酸0.4～400 ng·mL-1的线性范围良好,批内批间精密度RSD值均小于15%,且在室温放置6h、进样器放置24h及-80℃反复冻融3次考察条件下稳定,符合样本检测要求;2.给药后,肝组织切片显示各个给药组均有不同程度的肝损伤;ALT和AST及TBA在INH、RIF及HRZ组均显著升高(P<0.05),而PZA组升高相对较缓,其中RIF组胆汁酸升高最明显(P<0.01)。8种胆汁酸有显著变化,其中CA在给药组中均显著升高(P<0.05),野生型小鼠及临床患者在给予抗结核药物联合治疗后,CA浓度与ALT及AST有一定的相关性;3.FXR-/-小鼠显示给药后ALT及AST较野生型升高减缓,胆汁酸升高幅度也变小;野生型小鼠显示给药后FXR、SHP表达受到抑制,CYP7A1表达升高;联合OCA治疗后,相对于HRZ组,ALT、AST以及胆汁酸更趋于正常水平,同时对FXR、SHP、CYP7A1的表达有部分逆转作用。结论:1.抗结核药物诱导的肝毒性与胆汁酸代谢有关,CA变化最显著且其变化与ALT及AST有一定的相关性;2.FXR-胆汁酸是抗结核药物诱导的肝毒性可能的机制之一,OCA可部分逆转抗结核药物诱导的肝毒性。