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目的：构建人巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)优化密码子的表达载体，筛选稳定的高表达MIC-1的酵母菌株，探索MIC-1重组蛋白的纯化条件，并制备抗MIC-1多克隆抗体，为胰腺癌血清诊断试剂的研制奠定基础。方法：通过RT-PCR及基因克隆技术自人胎盘组织中获得MIC-1 cDNA的全基因片段；通过PCR技术将MIC-1 cDNA基因片段5’端的7个毕赤酵母非偏好密码子定点突变为其同义优越密码子；构建pPIC9K-mtMIC-1表达载体，转染并在毕赤酵母GS115工程菌中表达MIC-1重组蛋白，通过G418抗性筛选稳定的MIC-1高表达菌株；研究不同表达条件对MIC-1重组蛋白表达量的影响；研究和初步建立MIC-1重组蛋白的纯化方案及工艺；以纯化的重组MIC-1蛋白为抗原免疫新西兰白兔，制备抗MIC-1的多克隆抗体。结果：成功克隆MIC-1 cDNA，并构建优化密码子的MIC-1重组蛋白表达载体；获得稳定的高表达重组蛋白毕赤酵母菌株，表达量约为30～50mg／L；初步建立了MIC-1重组蛋白中试发酵工艺；建立较完整的MIC-1重组蛋白的分离纯化体系，纯化所得重组蛋白经SDS-PAGE电泳检测纯度达90％以上；获得抗MIC-1重组蛋白的多克隆抗血清，抗体效价为1：128，000。结论：通过优化密码子的MIC-1重组蛋白表达载体，重组MIC-1毕赤酵母菌株的表达量显著高于国际上其他单位该蛋白的表达水平；优化了发酵、表达和纯化工艺，重组蛋白纯度达90％以上；以纯化蛋白为抗原获得了高效价的抗MIC-1多克隆抗体。该项研究为MIC-1蛋白的功能研究及其抗体的临床诊断试剂研制奠定了基础。