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研究背景：系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）高发于育龄期女性，是一种累及多系统、多器官的自身免疫性疾病。对SLE发病机制的研究很多，但大都集中在淋巴细胞的作用方面，而另一大群细胞——中性粒细胞有没有病理作用却知之甚少。近年来发现中性粒细胞凋亡参与自身免疫性肝炎、溃疡性结肠炎等疾病的炎症病变，但是否参与SLE的病理过程还鲜见报道。雌激素及其受体（estrogen receptor，ER）在SLE的病理过程中具有重要作用，这已经得到了广泛认同，但它们在SLE炎症病变中的作用及作用机理尚不明确，更缺乏雌激素对中性粒细胞作用的研究。目的：通过检测女性SLE活动期患者和健康女性对照组外周血中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils，PMNs）的凋亡率，分析SLE是否存在PMNs凋亡异常，再研究PMNs凋亡相关分子和信号通路以及炎性细胞因子在雌激素处理前后的变化，探讨雌激素及ER在SLE患者PMNs凋亡中的作用及其机理。方法：1．以60例女性SLE活动期患者作为研究对象，收集其空腹外周静脉血，EDTA抗凝，分离血浆于-80℃保存备用，同时无菌分离PMNs。收集SLE患者的临床资料。以50例女性健康体检者作为正常对照组。2．经酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清E2、IFN-α、IL-10、TNF-α和IL-17的浓度，比较SLE患者组和正常对照组之间的差异，分析E2与上述细胞因子的相关性，以明确SLE相关的炎症因子和雌激素可能的下游靶分子。3．经流式细胞术（flow cytometry，FCM）测定PMNs的凋亡率，比较SLE患者组和正常对照组之间的差异，分析凋亡率与雌二醇（estradiol，E2）、系统性红斑狼疮疾病活动指数（systemic lupus erythematosus diseaseactivity index，SLEDAI）、C3、IgG水平等临床指标的相关性，以明确PMNs凋亡与SLE疾病活动度的相关性。4．经E2分别处理SLE组和正常对照组PMNs24h（设未加E2的空白孔做组内对照），分别收集细胞和培养上清，培养上清于-80℃冻存，经ELISA测定培养上清中TNF-α浓度，分析雌激素处理前后TNF-α浓度变化；细胞做以下处理：（1）经FCM测定凋亡率，比较雌激素处理与未处理细胞之间的差异；（2）提取细胞总RNA，实时荧光定量聚合酶链反应（real-timequantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）测定bax mRNA水平，比较雌激素处理与未处理细胞之间的差异；（3）比色法测定Caspase-3、8、9酶活性，比较雌激素处理与未处理细胞之间酶活性的差异，探讨雌激素刺激PMNs凋亡的可能机制，以明确雌激素在细胞凋亡信号通路中的作用。结果：1.女性SLE患者组与正常对照组相比，血浆E2的浓度（114.64±36.99pg/ml vs80.86±28.60pg/ml，P=0.000）、IFN-α的浓度（66.61±18.74pg/mlvs31.08±7.68pg/ml，P=0.000）、IL-10的浓度（4.69±2.00pg/ml vs2.85±0.72pg/ml，P=0.000）、TNF-α的浓度（15.21±6.87pg/ml vs8.26±2.47pg/ml，P=0.000）、IL-17的浓度（29.31±10.71pg/ml vs15.41±5.87pg/ml，P=0.000）均显著增高；E2与IFN-α（P=0.005）、IL-10（P=0.000）、TNF-α（P=0.000）浓度均呈正相关，与IL-17无显著相关性（P=0.298）。2.女性SLE患者PMNs的凋亡率明显高于正常对照（3.98%±1.95%vs1.85%±0.68%，P=0.000）。3.女性SLE患者PMNs的凋亡率与SLEDAI无显著相关性（P=0.0816），与C3水平呈负相关（P=0.000），与E2、IgG、TNF-α浓度呈正相关（P=0.000）。4. PMNs经浓度为1×10-6mol/L的E2处理24h后，与未经E2处理的PMNs相比较，（1）SLE患者组：凋亡率（49.39%±10.53%vs46.15%±10.13%，P=0.002）、bax mRNA水平（0.0224±0.015vs0.0269±0.0172，P=0.031）和Caspase-3酶活性（14.93±3.30vs16.59±3.69， P=0.010）均显著降低（P<0.05），Caspase-8酶活性（3.91±2.01vs3.90±1.98，P=0.876）、Caspase-9酶活性（14.61±5.98vs14.73±5.94，P=0.374）、培养上清中TNF-α的浓度（21.26±10.92pg/ml vs20.26±9.43pg/ml，P=0.629）差异均无统计学意义。（2）正常对照组：凋亡率（41.83%±13.25%vs42.24%±13.95%，P=0.679）、bax mRNA水平（0.0140±0.0071vs0.0137±0.0065，P=0.475）、Caspase-3酶活性（10.40±3.52vs10.61±3.46，P=0.064）、Caspase-8酶活性（1.96±1.28vs1.93±1.23，P=0.621）、Caspase-9酶活性（10.78±3.78vs11.21±3.67，P=0.093）、培养上清TNF-α的浓度（17.29±7.83pg/ml vs17.91±8.28pg/ml，P=0.715）差异均无统计学意义。结论：1.女性SLE患者血浆的E2、IFN-α、IL-10、TNF-α、IL-17的浓度显著高于正常对照，说明E2、IFN-α、IL-10、TNF-α、IL-17可能参与SLE的病理过程；E2与IFN-α、IL-10、TNF-α水平呈正相关，表明雌激素与SLE的炎性病变具有相关性。2.女性SLE患者外周血PMNs的凋亡率高于正常对照，与部分评价SLE疾病活动指标有显著相关性，说明PMNs凋亡紊乱可能参与SLE病理过程。3.一定浓度的E2可能通过下调PMNs中促凋亡基因bax表达和抑制凋亡通路中Caspase-3酶活性而抑制PMNs凋亡，进而促进SLE的发生发展。