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目的研究小鼠骨髓来源树突状细胞及淋巴细胞各亚群的HO-1表达,并研究HO-1特异性诱导剂对不同成熟度树突状细胞的效应。方法分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞；流式细胞术比较悬浮树突状细胞及贴壁树突状细胞表型差异以及HO-1表达水平差异；分别使用50uM CoPP和SnPP与贴壁未成熟树突状细胞共同孵育2h,采免疫印迹法和流式细胞术比较上述几群细胞HO-1表达水平差异；LPS刺激细胞成熟,随后加入CoPP孵育,流式细胞术检测CoPP孵育前后细胞表型及HO-1表达水平差异；磁珠分选CD4+细胞,使用CD3/CD28刺激2d为效应T细胞,磁珠分选CD4+CD25-T淋巴细胞及CD4+CD25+T淋巴细胞,流式细胞术分别检测CD4+CD25-T淋巴细胞及CD4+CD25+T淋巴细胞、CD4+效应T细胞、CD8+T淋巴细胞和CD19+B淋巴细胞HO-1表达水平。结果贴壁树突状细胞共刺激分子表达较低,HO-1表达更高(平均荧光强度41.4Vs.26.5)：CoPP可以诱导未成熟树突状细胞高表达HO-1(P<0.05),但是对成熟DC没有影响；CD4+CD25+Treg及激活后的CD4+T细胞均表达HO-1,而在CD8+T淋巴细胞和CD19+B淋巴细胞中几乎不表达。结论CoPP可以增加未成熟树突状细胞HO-1表达,但不能增加成熟树突状细胞HO-1的表达。HO-1在调节性T细胞和活化后的效应细胞中表达。目的研究HO-1对小鼠未成熟树突状的成熟能、免疫调节能力及诱导调节性T细胞的能力的影响。方法流式细胞术检测CoPP或SnPP孵育未成熟贴壁树突状细胞后表型及刺激同种异体淋巴细胞增殖能力的变化；流式细胞术检测LPS刺激CoPP孵育后的树突状细胞的表型变化；流式细胞术检测CoPP或SnPP孵育后贴壁树突状细胞对CD3/CD28刺激的淋巴细胞增殖的抑制能力变化,并使用Transwell判断树突状细胞的抑制能力是否依赖细胞接触。流式细胞术检测CoPP或SnPP孵育后贴壁DC对Treg诱导能力的变化。结果CoPP或SnPP孵育未成熟树突状细胞后低表达MHCII/CD80/CD86,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力均很弱。CoPP处理后的未成熟树突状细胞经LPS刺激后,MHCII/CD80与MHCII/CD86双阳性细胞分别为20.09%和10.15%,而未经CoPP处理的树突状细胞经LPS刺激后,MHCII/CD80与MHCII/CD86双阳性细胞分别为45.47%和31.59%。抗小鼠CD3/CD28抗体可明显刺激淋巴细胞增殖,其中CD4+细胞增殖85.3%,CD8+细胞增殖81.5%。加入未成熟树突状细胞后可明显抑制淋巴细胞增殖,且随抑制细胞与反应细胞比例下降,其抑制能力随之减弱。在抑制细胞与反应细胞比例为1：16时,未处理组、CoPP处理组、SnPP处理组中CD4+细胞增殖比例分别为48.1%、31.6%和61.6%,CD8+细胞增殖比例分别为57.8%、38.9%和70.5%。加入Transwell后,树突状细胞抑制能力消失。CoPP处理组树突状细胞与未处理组诱导调节性T细胞能力接近,分别为20%和22%,但是SnPP处理组诱导调节性T细胞能力下降,比例仅为12%。结论诱导未成熟树突状细胞高表达HO-1可增强其抵御成熟的能力及抑制T细胞增殖的能力。树突状细胞抑制增殖的能力依赖于细胞接触。抑制未成熟树突状细胞HO-1活性可抑制其诱导调节性T细胞的能力。目的研究一氧化碳对淋巴细胞增殖的影响。方法将100uM一氧化碳释放分子(CORM-2)与未分选淋巴细胞、磁珠分选CD4+淋巴细胞和磁珠分选CD4+CD25-细胞孵育,随后用抗小鼠CD3/CD28抗体刺激淋巴细胞增殖,2至3天后采用流式细胞术检测淋巴细胞增殖情况。结果根据淋巴细胞干预方式分为：空白对照组,iCORM-2对照组及CORM-2实验组。反应细胞为淋巴结淋巴细胞时,与100uM CORM-2共同孵育后,在CD3/CD28的刺激作用下基本不增殖。而两对照组淋巴细胞在CD3/CD28刺激3天后CD4+淋巴细胞与CD8+淋巴细胞均增殖85%以上。反应细胞为分选后CD4+淋巴细胞时,在CD3/CD28的刺激2天后,实验组有35%的CD4+淋巴细胞增殖,对照组达到70%左右。当CD3/CD28刺激3天后,CD4+淋巴细胞增殖细胞比例进一步增加,达到57%,两个对照组细胞比例大于65%。反应细胞为分选后CD4+CD25-淋巴细胞时,在CD3/CD28的刺激2天后增殖较少,实验组有23%的CD4+淋巴细胞增殖。而iCORM-2组与未处理组淋巴细胞增殖均达到35%以上。当CD3/CD28刺激3天后,CD4+CD25-淋巴细胞增殖细胞比例为10%,两个对照组细胞比例约为50%。结论CO对CD3/CD28刺激的未分选淋巴细胞、分选后CD4+淋巴细胞及分选后CD4+CD25-淋巴细胞增殖均有显著抑制效应。目的研究CO对小鼠未成熟树突状成熟能力及免疫调节能力的影响。方法流式细胞术检测CORM-2或iCORM-2孵育未成熟贴壁树突状细胞后表型变化；流式细胞术检测LPS刺激CORM-2或iCORM-2孵育树突状后表型变化；流式细胞术检测CORM-2或iCORM-2孵育后贴壁树突状细胞对CD3/CD28刺激的淋巴细胞增殖的抑制能力变化。结果经过iCORM-2或CORM-2处理后的贴壁树突状细胞共刺激分子表达均无明显变化,MHC/CD40、MHCII/CD80与MHCII/CD86双阳性细胞比例均在2%以下。CORM-2处理后的未成熟树突状细胞经LPS刺激后,MHC/CD40、MHCII/CD80与MHCII/CD86双阳性细胞分别为19.8%、0.4%、8.88%。而无任何预处理的未成熟树突状细胞LPS刺激后MHCII/CD40、MHCII/CD80、MHCII/CD86双阳性的细胞可达34.3%、26.2%和36.1%。预先给予iCORM-2再使用LPS刺激的树突状细胞各项指标与成熟树突状细胞相似,双性细胞比例分别40.5%、27.8%和38.3%。CD3/CD28可以刺激T细胞活化,共同培养三天后,CD4+细胞与CD8+细胞分别增殖81%和78.1%。加入未成熟树突状细胞后增殖能力大大降低。当抑制细胞与反应细胞比例为1：4时,各组抑制效应最强,其中空白对照组贴壁未成熟树突状细胞、iCORM-2对照组、CORM-2实验组CD4+细胞增殖比例分别为33.9%,45.2%和51.7%。三组CD8+细胞增殖比例为64.7%、78.5%和85.1%。随着抑制细胞比例下降,各组细胞抑制能力也随之下降。当抑制细胞与反应细胞比例为1：16时,不同处理未成熟树突状细胞对淋巴细胞增殖的抑制能力接近,CD4+淋巴细胞增殖约为60%左右,CD8+淋巴细胞增殖均在80%左右。结论CO作用后的未成熟树突状细胞可以抵御LPS诱导的细胞成熟,但是并不能够进一步增强未成熟树突状细胞的免疫负调节能力。