引起衰老的因素复杂多样,越来越多的研究表明,饮食以及由饮食引起的肠道菌群及其代谢产物的调节等因素可引起内源性衰老,而过量活性氧（ROS）的产生引起的细胞氧化应激也是导致细胞内源性和外源性衰老的主要原因。三甲胺-N-氧化物（TMAO）是由富含胆碱、L-肉碱等的食物经肠道菌群转化产生的代谢物,人群研究发现人血浆TMAO的水平与年龄呈正相关,对内皮细胞的研究发现TMAO可引起氧化应激,导致心血管疾病。另一方面,作为衰老表型的皮肤炎症和胶原蛋白流失与自由基损伤有着密切关联,同时研究也发现慢性皮肤炎症性疾病与肠道菌群失衡有关。因此,TMAO可能引发皮肤细胞氧化应激,从而导致细胞功能异常,促进皮肤细胞衰老,然而目前尚无相关研究报道。本研究旨在明确TMAO对人皮肤角质形成细胞（HaCaT）和成纤维细胞（HSF）氧化应激的作用,阐释TMAO对皮肤衰老影响的分子机制;并评价抗氧化剂原花青素B2（PB2）和维生素C（Vc）的干预作用,基于代谢组学探究其干预作用的机制,主要研究结果如下:（1）以H2O2处理作为氧化损伤对照,探究不同浓度TMAO对HaCaT和HSF细胞氧化应激的影响。TMAO分别在25-75 m M和50-150 m M处理显著降低HSF和HaCaT细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力和总抗氧化能力（T-AOC）（p＜0.05）,并显著升高ROS和丙二醛（MDA）水平（p＜0.05）,但其氧化损伤指标显著低于损伤对照组（p＜0.05）。此外,TMAO分别在25-75 m M和50-150 m M显著提高HaCaT和HSF的细胞凋亡率（p＜0.05）,并呈剂量依赖性关系,表明TMAO会导致HaCaT和HSF细胞产生氧化应激,促进细胞凋亡。（2）运用酶联免疫吸附（ELISA）和逆转录实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）探究TMAO对HaCaT和HSF细胞产生损伤的影响。TMAO处理能够显著升高HaCaT和HSF细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）和基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的表达水平（p＜0.05）,显著降低HaCaT和HSF细胞胶原合成基因（COL1A1）和诱导型一氧化氮氧合酶（iNOS）的mRNA转录水平（p＜0.05）,表明TMAO诱导皮肤炎症反应,加速胶原流失,破坏细胞结构完整性。（3）运用蛋白质免疫印迹（WB）探究TMAO诱导HaCaT和HSF细胞产生的氧化应激对核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。TMAO能够显著升高HaCaT和HSF细胞p-p65蛋白表达水平（p＜0.05）,表明TMAO可能通过氧化应激介导激活NF-κB信号通路,促进HaCaT和HSF细胞NF-κB磷酸化,从而诱导炎症反应,并降低胶原合成和加速胶原降解,促进皮肤细胞衰老。（4）选用Vc和PB2作为抗氧化剂干预,评价其对TMAO诱导的HaCaT和HSF细胞氧化应激的改善作用。1.56μg/m L的PB2能够显著提高TMAO诱导降低的HaCaT和HSF细胞GSH和CAT活性（p＜0.05）,与Vc没有显著性差异（p＞0.05）;Vc和PB2能够显著降低HaCaT和HSF细胞内ROS水平（p＜0.05）。并且,PB2能够显著降低HaCaT和HSF细胞IL-6水平（p＜0.05）,显著升高COLⅠ水平（p＜0.05）,与Vc没有显著性差异（p＞0.05）,表明Vc和PB2能减轻TMAO诱导的HaCaT和HSF细胞的氧化应激,降低炎症及减少胶原蛋白流失,改善皮肤结构和功能。（5）运用LC/MS探究Vc和PB2对细胞代谢组学的影响机制。Vc和PB2均对苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢及嘌呤代谢等12条代谢通路有调节作用,其中,PB2对嘌呤代谢的调节作用强于Vc组,此外,PB2能够调节磷酸戊糖途径和谷胱甘肽代谢,Vc能够调节亚油酸代谢,这些代谢通路能够在细胞的能量、信号传导、氧化还原、氧化应激、胶原合成等方面进行调控。综上所述,TMAO可诱导HaCaT和HSF细胞产生氧化应激,促进细胞凋亡与炎症反应,并降低胶原蛋白合成水平及增加MMP-1表达加速胶原蛋白降解,使胶原蛋白含量降低,导致皮肤老化。其主要可能的机制是TMAO通过氧化应激介导激活NF-κB信号通路,诱导皮肤衰老表型。而Vc和PB2能够干预氧化应激产生,降低炎症和和胶原流失,并可能通过调节苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成等代谢通路延缓TMAO诱导的皮肤衰老。本研究有助于进一步认识肠道菌群代谢产物TMAO对细胞衰老的作用机制,并为抗氧化剂对TMAO介导的衰老干预提供了一定的理论依据。