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目的:寻找海洋柴油降解菌株,探讨构建高效降解菌群,并行固化处理,为生物修复海水柴油污染提供依据。方法:1.获取柴油污染较严重的港口海水为分离源,接种于含柴油的人工海水培养基中,经过五个周期(每个周期为5d)的富集、培养后,进行分离纯化,得到单个菌落,命名其为F9。采用形态学观察、生理生化特征分析及16s rDNA测序等方法对分离得到的菌株进行鉴定;2.对F9菌株的降解性能进行研究,紫外分光光度法测定不同温度、pH、初始接种浓度、油浓度对其降解柴油的影响,并用气相色谱-质谱方法(GC-MS)分析其对柴油各组分的降解效能;3.以从柴油污染海水中富集、筛选得到的4株柴油高效降解菌株为基础进行组合优化试验,并对其降解性能进行研究,利用紫外分光光度法测定降解率,GC-MS方法分析菌群对柴油组分的降解;4.以海藻酸钠-壳聚糖-小米为复合载体固定化混合菌群,紫外分光光度法测定其对柴油的降解率,GC-MS方法分析菌群对柴油组分的降解。结果:1. F9菌株初步鉴定为不动杆菌属(Acinetobacter),并最接近于威尼斯不动杆菌(Acinetobater venetianus),二者同源性高达99.9%。菌株不产芽孢,严格需氧型,氧化酶阴性,过氧化氢酶阳性,不能利用D-葡萄糖、D-核糖、D-木糖和L-阿拉伯糖,只能在以柠檬酸钠为碳源的培养基上生长,能够利用硝酸钾和硫酸铵作为氮源,不需要生长因子,在37℃条件下生长,但不能在44℃下生长;2.对F9菌株的柴油降解性能进行研究发现,F9菌株在培养液人工海水培养基(MMC)为50mL,pH7.5,温度为30℃,初始接种浓度为0.5%,柴油浓度为0.5%时对柴油的降解效果最佳,7d能达到90.24%,通过GC-MS分析观察F9菌株对柴油的各组分均有一定的降解作用;3.在实验室条件下对4株柴油降解菌进行优化组合,构建由S1、F9、Y9、W3组成的复合菌群,且四株菌比例为S1:F9:Y9:W3=1:1:2:1时,该菌群在培养液条件为MMC为50mL、pH7.5、温度30℃、初始接种浓度1%、柴油浓度为0.5%时,对柴油的降解效果最佳,2d能达到降解效率的71.25%;4.采用海藻酸钠-壳聚糖-小米复合载体固定化混合菌群,降解3d后对柴油的降解效率达到94.98%,7d时降解率为95.15%,复合载体固定混合菌群后,既能对柴油有吸附和分散作用,又可充分利用混合菌群对柴油进行生物降解作用,相比游离混合菌的降解速率提升迅猛,显著强化了混合菌群的降解效果,有利于将其投入污染港口进行海水环保性修复。结论:从被海洋污染的海水中分离纯化出一株柴油降解菌F9,该菌属于威尼斯不动杆菌,能快速有效的降解柴油,构建的固定化优势菌群对柴油具有较强的降解作用,底物范围广泛,有望应用于海洋柴油污染的生物修复。