目的:梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)是一种极具侵袭力的“隐匿性”病原体,可通过血液、淋巴系统从感染部位迅速扩散至宿主其他多个远端组织器官,引发机体持续性、系统性多组织器官慢性损伤。本研究旨在探究Tp在新西兰兔多个组织脏器中的复制增殖过程及感染依赖性抗原Tp0971的免疫保护性效果。方法:1.将提纯的Tp悬液以皮内注射的方式感染新西兰兔,密切观察接种部位的皮肤红肿硬结变化过程,并记录红肿硬结直径、硬结溃疡出现时间和统计溃疡率;2.感染后的第3、7、14、21、35、65、100和130天分别随机处死三只新西兰兔,收集血液、背部接种位点皮肤、睾丸、心脏、肝脏、肺脏、脾脏和肾脏组织,提取组织中的总DNA,qPCR检测各DNA标本中的Tp DNA水平;3.将诱导纯化的Tp0971重组蛋白联合CpG ODNs佐剂免疫新西兰兔,并设置CpG佐剂对照组及PBS对照组,ELISA检测三组新西兰兔血清中的Tp0971特异性IgG抗体水平;4.末次免疫两周后,以皮内注射方式接种1mL含1×10~7 T.pallidum的Tp悬液,连续30天观察接种部位的皮肤红肿、硬结和溃疡的变化情况,记录硬结直径、皮损出现及开始愈合时间,计算接种位点溃疡率;5.Tp感染后第3、7、14、21、35、65、100和130天,每组随机处死三只新西兰兔,qPCR检测血液、接种处皮肤、睾丸、心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏等组织器官中的Tp载量;福尔马林固定皮肤及睾丸组织样本,进行HE染色并分析炎症细胞浸润情况。结果:1.通过皮内注射接种Tp后第4天,接种位点皮肤开始出现红肿硬结,第6天出现溃疡现象,第14天红肿溃疡率达到峰值(76.4%),第24天溃疡基本愈合;2.在感染后的14天内,Tp主要分布在皮肤接种部位;第21天,Tp主要分布在血液和含血量丰富的组织脏器(如:心脏、肺、肝脏和肾脏);自第35天起,血液和各组织中的Tp载量无明显差异;3.新西兰兔接种部位皮肤的Tp载量在接种后21天内保持在高水平状态(约为10~4 flaA copies perμg of rabbit DNA);第35天下降至较低水平后呈现为缓慢增高趋势。其他多个组织脏器在感染后第3天均可检测到Tp DNA;感染后第21天,Tp载量达到相对较高水平;第100天和第130天时,各组织脏器中的Tp DNA水平呈现为缓慢增加或趋于平衡的状态;4.成功诱导表达Tp0971重组蛋白,Western blot鉴定出现特异性目的条带;5.Tp0971/CpG联合免疫可诱导机体产生高水平的Tp0971特异性IgG型抗体,且在免疫期间内抗体水平显著高于CpG及PBS对照组(P<0.01);6.Tp0971/CpG免疫延缓了新西兰兔皮肤溃疡的发生,促进了溃疡的愈合,对皮肤损伤具有一定的免疫保护效果;但不能抑制Tp向机体的远端组织脏器扩散;7.病理组织切片分析表明,Tp0971/CpG免疫组皮肤中组织胶原纤维细胞增生、肥大,真皮层有大量慢性炎症细胞浸润;睾丸组织中并无明显的炎症细胞浸润。结论:1.新西兰兔感染梅毒后可表现出和患者相似的临床症状,且在整个感染过程中各器官组织中Tp载量呈现为降低、升高的循环反复的动态变化过程;2.Tp0971/CpG免疫新西兰兔不能完全清除宿主体内的Tp,也不能抑制Tp向其他远端组织中扩散。