褶皱臂尾轮虫遗传学材料属性的初步探究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gusano1987
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褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatili)是轮虫动物门(Rotifera)中的广盐种,广泛分布于内陆淡水和沿海咸水生境中。其在水生生态系统中占有非常重要的地位,也是海水水产养殖中重要的育苗饵料,因此具有良好的经济价值和研究意义。褶皱臂尾轮虫来源广泛、个体微小、生活力强、培养条件宽松,是一种理想的实验室研究材料。生活史特征为孤雌生殖(parthenogenesis)和有性生殖(sexual reproduction)世代交替进行。在孤雌生殖阶段,雌性个体经有丝分裂产生非需精卵(amictic egg),进行“克隆生殖”;在有性生殖阶段,雌性个体经减数分裂产生单倍体需精卵(mictic egg),未受精的需精卵发育成雄性个体(male),受精的需精卵则发育形成卵壳较厚的休眠卵(resting egg)。休眠卵能抵御外界不良环境并在适宜条件下孵化进入新一轮的孤雌生殖阶段。本研究通过对褶皱臂尾轮虫的实验室观察培养,能够利用简单的培养设备和条件,实现实验室人工培养、完成世代交替生活史、有效地诱导产生有性生殖和休眠卵的孵化;探索了适用于遗传学研究的自交和杂交试验方法;分别培养获得连续自交后代和杂交后代;利用FIASCO法构建褶皱臂尾轮虫基因组微卫星DNA(microsatellite DNA)富集文库,筛选得到了数量较多的微卫星DNA标记,并选取一部分标记设计引物,利用微卫星DNA标记在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的分型情况,对杂合亲本连续自交后代纯度以及杂交试验中亲代位点标记在子代中的分离规律进行了观察检测。其中,在某一微卫星位点杂合的亲本经连续自交产生的F4代在该位点分别出现纯合子和杂合子,且纯合子占85%左右;杂交试验中,亲代标记在子代中发生了分离,并且符合遗传学分离规律,从而确定了杂交试验方法的可行性,初步探讨了褶皱臂尾轮虫染色体倍性问题。本研究认为,褶皱臂尾轮虫易培养、有良好的研究价值和经济价值、适用于实验室遗传操作,具备成为遗传学研究材料的潜能;但是距离成为一种成熟的遗传学研究材料甚至模式生物,还需要进一步的深入研究。
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