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目的：研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes介导的表皮生长因子受体（EGFR）对人脐静脉内皮细胞MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的影响，及其对VEGF自分泌作用的研究，初步探索肿瘤细胞源Exosomes与肿瘤组织中的血管内皮细胞的作用机制，为深入探索肿瘤细胞来源Exosomes在肿瘤微环境中的重要作用提供理论基础。方法：1．以MDA-MB-231细胞与HUVECs细胞为研究对象，采用低温超速离心和蔗糖密度梯度离心法提取MDA-MB-231细胞源Exosomes，利用流式细胞术（FCM）检测MDA-MB-231细胞源Exosomes对HUVECs细胞周期的影响。2．通过MDA-MB-231细胞源Exosomes与HUVECs细胞共培养，免疫荧光法观察MDA-MB-231细胞源Exosomes对HUVECs细胞EGFR、p-EGFR的表达及分布；Western blot检测MDA-MB-231细胞源Exosomes对HUVECs细胞ERK1/2及Akt蛋白活化的影响，并设EGFR酪氨酸激酶抑制剂ZD1839预处理组。3．ELISA法检测MDA-MB-231细胞源Exosomes与HUVECs细胞共培养后上清液中VEGF的蛋白水平；RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-231细胞源Exosomes对HUVECs细胞VEGF的mRNA和蛋白表达水平的影响；Western blot测定MDA-MB-231细胞源Exosomes对HUVECs细胞VEGFR2、p-VEGFR2蛋白表达水平的影响。实验中同时设EGFR酪氨酸激酶抑制剂ZD1839预处理组。结果：1．HUVECs细胞经低浓度血清饥饿培养同步化后，重新加入完全培养液刺激HUVECs细胞进入细胞周期。FCM检测细胞周期结果显示，经200μg/mL浓度的Exosomes作用HUVECs细胞24h后，与对照组相比，HUVECs细胞中S期细胞比例增加，G1/S期细胞比例下降。2．免疫荧光结果显示，HUVECs细胞经200μg/mL的Exosomes作用24h后，EGFR与p-EGFR在HUVECs细胞膜与细胞质中均出现表达。与此同时，Western blot结果显示，HUVECs细胞中p-ERK1/2与p-Akt蛋白表达增加，并且具有时间依赖性，相比之下，50μg/mL浓度的EGFR酪氨酸激酶抑制剂ZD1839预处理后，HUVECs细胞中p-ERK1/2与p-Akt蛋白的表达没有受Exosomes的作用而相应上调。3．ELISA实验结果显示，HUVECs细胞经200μg/mL的Exosomes作用24h后，VEGF分泌增加。RT-PCR和Western blot检测结果显示Exosomes作用后，HUVECs细胞VEGF mRNA及蛋白表达均增多，同时，p-VEGFR2蛋白在HUVECs细胞中表达增加，而ZD1839预处理组显示，VEGF mRNA及蛋白表达、p-VEGFR2磷酸化水平下降。结论：1．MDA-MB-231细胞源Exosomes促进了HUVECs细胞EGFR表达，增加了HUVECs细胞中S期细胞的比例。由于MDA-MB-231细胞源Exosomes携带的EGFR向HUVECs细胞的转移，持续活化了MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路，因此对于HUVECs细胞的增殖起到促进作用。2．MDA-MB-231细胞源Exosomes介导的EGFR向HUVECs细胞的转移，促进了HUVECs细胞VEGF的自分泌，并且活化了p-VEGFR2，通过激活VEGF/VEGFR2信号通路，Exosomes对促肿瘤血管生成可能起到一定调控作用。