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目的:观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时TIAGR表达情况;TIGAR在缺氧缺血性脑损伤中的作用以及其焦亡机制的初步研究。方法:采用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemia brain damage,HIBD)模型和体外培养大鼠小胶质细胞系(HAPI)氧糖剥夺再灌注(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模型。运用Western blot方法检测HIBD后脑皮层组织中和OGD/R后大鼠小胶质细胞系中TP53诱导糖酵解和细胞凋亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)以及焦亡相关蛋白 GSDND-N、caspase-1、IL-1β的表达情况。用构建的干扰TIGAR的慢病毒转染大鼠小胶质细胞系后,免疫荧光和Western blot方法检测TIGAR感染率和蛋白表达,使用CCK-8和LDH试剂盒检测TIGAR对OGD/R后的大鼠小胶质细胞系活性和毒性的影响。由慢病毒构建的干扰TIGAR(LV-sh_TIGAR)通过左侧纹状体和左侧侧脑室注射大鼠脑内,运用免疫荧光法、小动物荧光活体成像技术和Western blot检测TIGAR感染率和蛋白表达,采用脑梗死体积评价TIGAR对缺氧缺血性脑损伤的影响。用构建的干扰TIGAR的慢病毒转染大鼠小胶质细胞系后,使用Western blot方法检测LV-sh_TIGAR对OGD/R后24 h大鼠小胶质细胞系中焦亡相关蛋白的含量变化的影响。在LV-sh_TIGAR大鼠小胶质细胞系中,应用NADPH后,DHE染色检测NADPH对OGD/R诱导细胞内ROS水平的影响,运用NADPH/NADP+和GSH/GSSG试剂盒检测 NADPH对OGD/R诱导细胞内NADPH以及GSH/GSSG水平的影响,Western blot方法检测NADPH对OGD/R后24h细胞中焦亡相关蛋白的含量变化的影响,CCK-8、LDH试剂盒检测NADPH对OGD/R后的细胞活性和毒性的影响。同时,在LV-sh_TIGAR新生大鼠中,应用NADPH后,通过TTC染色法、HE染色法、电镜法以及免疫组化染色法检测NADPH对缺氧缺血性脑损伤的影响。结果:HIBD后脑皮层组织内TIGAR、GSDMD-N、caspase-1、IL-1β的表达量增加,并且在24 h这个时间点达到高峰;OGD/R后大鼠小胶质细胞系内TIGAR、GSDMD-N、caspase-1、IL-1β的表达量增加,并且在24 h这个时间点达到高峰。在大鼠小胶质细胞系中慢病毒构建干扰TIGAR有效地降低TIGAR的表达。干扰TIGAR加重OGD/R诱导的大鼠小胶质细胞系损伤。慢病毒构建的干扰TIGAR能够有效地侵染脑组织,可干扰TIGAR的表达,LV-sh_TIGAR可增加HIBD后大鼠脑梗死体积。干扰TIGAR可增加OGD/R后24 h大鼠小胶质细胞系内GSDMD-N、caspase-1、IL-1β蛋白水平。在LV-sh_TIGAR大鼠小胶质细胞系中,应用NADPH后:NADPH显著地抑制了干扰TIGAR诱导的大鼠小胶质细胞系死亡;干扰TIGAR显著地促进了OGD/R诱导的细胞内NADPH、GSH/GSSG水平的降低以及ROS水平的增强,而NADPH阻断了干扰TIGAR的作用;干扰TIGAR则降低OGD/R后24 h大鼠小胶质细胞系内GSDMD-N、IL-1β蛋白水平。同时,在LV-sh_TIGAR新生大鼠中,应用NADPH后:干扰TIGAR则减少HIBD后大鼠脑梗死体积,减轻脑皮层组织病理损伤和脑皮层细胞损伤,降低脑皮层组织中GSDMD-N的表达。结论:TIGAR对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用,其机制可能与增加内源性抗氧化剂NADPH降低细胞内ROS水平,抑制细胞焦亡的激活有关。