目的:本课题旨在通过检测KDM6A在口腔鳞状细胞癌中的表达情况及生物学功能研究,来探讨其可能参与调控的信号通路,及其对靶基因表达水平的影响,进而初步探明KDM6A在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用机制。主要分为以下两点:1.KDM6A在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的作用研究。2.初步探讨KDM6A调控口腔鳞状细胞癌增殖、迁移的分子机制。方法:1.利用生物信息学的方法分析KDM6家族在口腔鳞状细胞癌患者样本中的表达情况及突变情况,并结合病人的临床病理参数进行分析。2.利用免疫组织化学染色检测KDM6A在口腔鳞癌组织芯片中的表达水平。3.体外实验探究KDM6A对口腔鳞癌细胞增殖、迁移能力的影响,主要包括:CCK8、EDU增殖实验、划痕修复实验和Transwell迁移实验。4.对RNA-seq结果进行差异基因聚类、GO功能富集分析、KEGG分析寻找KDM6A可能参与的信号通路及受其调控的靶基因。结果:1.通过生物信息学分析发现,KDM6A在OSCC中的表达量明显低于口腔正常组织、KDM6B的差异表达分析无统计学意义、UTY在癌症组织中高表达;KDM6A在口腔鳞癌患者中基因突变频率为7%、KDM6B为1.9%、UTY未发生突变;KDM6A在女性患者中的表达多于男性,UTY则主要在男性患者中表达,而KDM6B的表达与患者性别之间无相关性;KDM6A和UTY的表达与患者生存时间显著相关,KDM6B的分析结果不具有统计学意义;KDM6A的m RNA表达水平与口腔鳞癌的恶性程度负相关。2.口腔鳞状细胞癌组织芯片免疫组织化学染色结果表明,与正常口腔组织相比KDM6A在癌症组织中低表达。3.细胞实验结果表明,敲低KDM6A促进OSCC的增殖和迁移,过表达KDM6A抑制其增殖和迁移。4.RNA-seq测序发现,敲低KDM6A后有1462个基因差异表达,其中表达下调的基因605个,表达上调的基因857个。差异基因的KEGG富集分析结合生物信息学分析,发现KDM6A可能通过Hippo singaling pathway调控其下游基因GSK3B发挥肿瘤抑制的作用。结论:KDM6A在口腔鳞状细胞癌中低表达,其高表达与患者更好的预后相关;KDM6A在体外抑制口腔鳞状细胞癌的增殖和迁移;KDM6A可能通过Hippo信号通路调控GSK3B发挥肿瘤抑制的作用。