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蜱是一种重要的体表寄生虫，是许多人和动物疾病的传播媒介，经蜱传播的病原体有病毒、立克次体、螺旋体以及原虫。为了寻找新的抗蜱免疫候选抗原，我们从镰形扇头蜱半饱血雌蜱唾液腺cDNA文库筛选目的EST序列，通过RACE方法获取该EST全长序列。用RT-PCR分析该基因在蜱体内的分布，并研究该基因是否含内含子。将该基因连接到pET-32a(+)表达载体，并转入宿主菌SL21(DE3)，经IPTG诱导表达，并对表达产物进行Westernblot分析。结果从该文库的EST中筛选得到了一个含polyA尾的肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)基因疑似序列，经5-RACE方法得到了该基因的全长序列。基因全长852bp，编码219个氨基酸，预测分子量约为25kDa。经同源性比较，该基因预测的氨基酸序列与长角血蜱肌钙蛋白Ⅰ(GenBank,GI：14041807)有很高的同源性(同源性为84.47％)，肌动蛋白结合位点位于147-167氨基酸处，且与长角血蜱肌钙蛋白Ⅰ肌动蛋白结合位点完全相同，表明该基因是镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ基因。RT-PCR分析表明，该基因在镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱以及壳、唾液腺、肠均有表达。以镰形扇头蜱基因组DNA为模板扩增到编码肌钙蛋白Ⅰ的基因组序列，测序分析，该序列不含内含子。TnⅠ基因可以在BL21中高效表达，融合蛋白分子量大小为45kDa。Westernblot分析表明，抗TnⅠ重组蛋白兔血清可以识别蜱体内的TnⅠ，并在22kDa和36kDa之间有两条带，说明在蜱体内可能同时存在两个大小不等的TnⅠ。综上所述，本研究首次克隆、表达了镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ基因，并对其功能进行了初步研究，为该基因的进一步研究打下了基础。