论文部分内容阅读
第一部分肝移植动脉化延迟模型的建立及初步研究
目的：建立简单的大鼠自体肝移植动脉化延迟模型,并初步研究动脉化延迟对移植肝的影响。
方法：
1.动物模型的建立。采用经腹主动脉灌注法对肝脏进行冷灌注,之后夹闭肝总动脉,切断胃十二指肠动脉并开放其起始部。门静脉复流结束无肝期,肝总动脉血管夹精确控制(肝动脉复流)肝动脉化延迟时间。
2.研究动脉化延迟对移植肝影响。采用TUNEL法检测冷灌注后和肝动脉化延迟(1小时)两个时间段肝细胞、胆管细胞凋亡情况。
结果：共做实验56例次,手术成功率98％(55/56)。冷灌注后光镜下显示肝脏灌注良好,未见红细胞残留。门静脉复流后见胃十二指肠动脉开口处有少量血液返流,光镜下见小叶间动脉充满红细胞。TUNEL法显示肝动脉化延迟1小时的凋亡肝细胞及凋亡胆管细胞较冷灌注完毕时明显升高(P<0.05),分别为64.00±14.17,1.14±1.31(个/视野)和123.50±38.20,6.52±3.42(个/视野)。
结论：本模型是研究肝动脉化延迟对移植肝影响较为理想的模型。肝动脉化延迟1小时,移植肝凋亡的肝细胞和胆管细胞均明显升高,导致细胞凋亡增多的原因可能为肝动脉缺血时间延长和门静脉血返流、淤积于肝动脉,但其具体机制仍需进一步研究。
第二部分肝动脉第二次灌注对动脉化延迟供肝的保护作用
目的：了解肝动脉第二次灌注利多卡因、肝素、阿拓莫兰和生理盐水混合液对动脉化延迟供肝的保护作用,为寻找预防或减少动脉化延迟对移植肝影响的方法奠定基础。
方法：
1.实验动物分组和标本采集：健康、成年、SPF级纯系SD大鼠36只,随机分成4组,A组为假手术组；B组为门静脉、肝动脉同时开放组；C组为肝动脉化延迟组；D组为肝动脉第二次灌注组。B、C、D组在门静脉开放1小时后留取标本。
2.观察指标：标本行病理形态学检查及TUNEL细胞凋亡检测。3.所有数据以均数士标准差(-x±s)表示,用SPSS13统计软件进行统计学处理,组间比较采用重复测量数据的方差分析(SNK)。
结果：
1.病理变化:A组无明显病理改变。C组改变最明显,D组次之,B组较轻。
2.凋亡情况:A组有少量的肝细胞和胆管细胞凋亡,与B、C、D组比较均有明显统计学意义。冷灌注后后凋亡肝细胞和胆管细胞明显增多,B、C、D组中,B组细胞凋亡最少,C组最多,D组居中,C组与D组比较有统计学意义；B组与D组比较无明显统计学意义。
结论：经肝动脉第二次灌注利多卡因、肝素、阿拓莫兰和生理盐水混合液对移植肝细胞和胆管细胞均有一定的保护作用,但其机制仍有待进一步研究探讨。