论文部分内容阅读
目的观察神经肽Ghrelin在杏仁核电点燃大鼠外周血与脑组织中的变化,探讨其原因及意义。方法健康雄性SD大鼠64只,随机分为点燃组(n=48)、假手术组(n=8)、空白组(n=8),点燃组以最后一次刺激为零点,再分为3h、6h、12h、24h、48h、72h六个亚组,每个亚组8只。点燃组植入电极后给予电刺激,制作杏仁核点燃膜型;假手术组只植入电极不予刺激;空白组不予处理。观察大鼠行为学及脑电图变化,采用ELISA、免疫组化和实时荧光定量PCR分别检测血清中和下丘脑中辛酰化Ghrelin表达情况。采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,计量资料用均数±标准差(x s)表示,采用单因素方差分析,组间比较用最小显著法(LSD-t)。结果(1)杏仁核电点燃致痫大鼠癫痫发作情况:点燃大鼠在刺激最初表现为胡须抖动、点头,随着刺激增多,出现抽搐、前肢阵挛等症状,完全点燃时表现为后肢站立并跌倒,全身抽动,湿狗样抖动,发作时间约15s到数分钟。点燃组后放阈为(441.54±52.43)μA,点燃速度为(7.12±2.13)d。实验组大鼠均可达到ⅴ级发作。(2)杏仁核电点燃致癫痫大鼠血清中辛酰基化Ghrelin的浓度变化:空白组与假手术组之间差异无统计学意义(P>0.05),各时间点辛酰基化Ghrelin水平与假手术组比较均降低(P<0.05)。各时间点组间比较,3h组与6h组、6h组与12h组、24h组与48h组、48h组与72h组比较,差异有统计学意义(P<0.05),12h组与24h组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)杏仁核电点燃致痫大鼠下丘脑中辛酰基化Ghrelin蛋白的表达:空白组与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,癫痫组各个时间点的辛酰基化Ghrelin表达水平均降低,各相邻组间比较3h组与6h组、6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组、48h组与72h组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)癫痫发作后大鼠下丘脑Ghrelin mRNA的表达:空白组与假手术组比较,GhrelinmRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。各时间点组与假手术组比较,GhrelinmRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);各时间点组间比较,3h组与6h组、6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组间比较,差异有统计学意义平(P<0.05);48h组与72h组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论癫痫发作后,血清与下丘脑中神经肽Ghrelin水平均降低且变化趋势是一致的,通过检测血清中辛酰基化Ghrelin水平,可以反映下丘脑中相应神经肽的变化趋势,可能成为临床癫痫诊断和疗效评估的一种新型检测指标。