兔骨髓间充质干细胞培养及体内示踪研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mythology_leonie
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目的采用贴壁法体外培养扩增兔骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)。用PLL@Fe3O4对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行体外标记,将标记过的细胞经兔耳缘静脉注入,行MRI检查了解其在肝脏中的分布情况。为干细胞移植治疗、MRI活体示踪提供基础性实验数据。方法1.采用贴壁法培养扩增兔BMSCs,通过形态学观察及流式细胞仪鉴定证实得到的细胞为BMSCs。2.用PLL@Fe3O4标记BMSCs。3. PLL@Fe3O4标记过的干细胞进行普鲁士兰染色,并在显微镜下观察其在BMSCs中的标记情况。4.台盼兰排斥实验及MTT法测定PLL@Fe3O4对BMSCs增殖及其活性的影响。5.将PLL@Fe3O4标记的兔BMSCs通过耳缘静脉输入兔体内行MRI检测,观察其在肝脏中的分布情况。结果1.倒置相差显微镜可观察到大量梭形和漩涡状贴壁细胞,流式细胞仪鉴定可见所培养的间充质干细胞高表达其表面标记物CD44,低表达CD14和CD45等造血细胞表面标志,可初步证实所培养的细胞为兔BMSCs。2.20 μg/ml PLL@Fe3O4标记的兔BMSCs对细胞无明显损伤及毒性,且标记率高,可安全用于细胞的标记。3.MRI检测在T2*W1序列上能明显观察到]PLL@Fe3O4标记的兔BMSCs可沉积在肝脏及其周围血管内,证明骨髓间充质于细胞可以通过外周血管进入肝脏。
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