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目的:青光眼是一类因为病理性眼压升高导致视盘凹陷性萎缩以及视野缺损、缩小为主要特征的眼部疾病。小梁网房水流出阻力增加是青光眼视神经损害的主要原因,而原发性开角型青光眼(Primary Open Angle Glaucoma,POAG)异常沉积的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)是房水自小梁网流出阻力增加、眼压升高的主要影响因素。本实验主要研究人眼小梁网细胞(Human Trabecular Meshwork Cells,HTMCs)中,micro RNA-1(mi RNA-1)对HTMCs细胞功能及纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)的调控作用,为青光眼诊治开发新的靶点。方法:300μM过氧化氢(H2O2)刺激HTMCs 2h后,Real-time PCR检测细胞中mi RNA-1基因的表达变化。Lipofectamine 2000转染mi RNA-1过表达质粒,应用CCK-8实验,检测过表达mi RNA-1后对HTMCs增殖活性的影响,Transwell迁移实验检测HTMCs的迁移能力。Real-time PCR,western blot和免疫荧光检测过表达mi RNA-1后HTMCs的纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)基因和蛋白的表达变化。双荧光素酶报告基因和生物信息学预测靶基因的方法来验证mi RNA-1对FN的靶定作用。结果:1)300u M H2O2刺激HTMCs 2h建立氧化应激模型后,相对于无血清处理组,mi RNA-1基因表达水平下调;FN的m RNA表达水平上调;2)而转染mi RNA-1质粒后,相对于对照组,q PCR结果显示mi RNA-1表达水平上调;CCK-8法检测转染质粒后HTMCs的增殖活性的变化,pc DNA3对照组相对表达量是0.84+0.01,pc DNA3/pri-1实验组相对表达量是0.93+0.03,两组相比差异具有显著性意义(p<0.05);Transwell法检测转染质粒后HTMCs的迁移能力的变化,pc DNA3-对照组相对表达量是111+1.86,pc DNA3/pri-1实验组相对表达量是210+4.9,两组相比差异具有显著性意义(p<0.05)。提示转染pc DNA3/pri-1质粒可以促进HTMCs的增殖活性和迁移能力;3)q PCR显示过表达mi RNA-1会抑制FNm RNA的表达水平,转染c DNA3/pri-mi RNA-1实验组相对表达量是0.66±0.12,;western blot显示过表达mi RNA-1会抑制FN蛋白水平的表达,转染c DNA3/pri-mi RNA-1实验组相对表达量是0.62±0.11;免疫荧光的结果进一步验证了过表达mi RNA-1对FN蛋白水平的影响;4)三种mi RNA靶基因预测软件和双荧光素酶报告基因实验说明mi RNA-1可以靶定FN结论:在HTMCs氧化应激模型中,mi RNA-1表达水平下调和FN的m RNA表达水平上调;而过表达的mi RNA-1可以上调HTMCs的增殖活性和迁移能力。mi RNA-1可以直接靶定FN并抑制FN的表达,这可能为青光眼的治疗提供新途径。