背景脓毒症尤其严重脓毒症仍是面临的主要健康问题之一,是重症监护病房(ICU)病人的首要死亡因为。内皮细胞激活、功能障碍和损伤是严重脓毒症及多器官功能障碍综合征(MODS)的重要特征。内皮通透性增高所致微血管渗漏是严重脓毒症和MODS的重要病理生理。血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)为内皮细胞特异性膜蛋白,是内皮细胞之间黏附连接的主要成分。VE-cadherin介导的细胞间同型黏附在内皮屏障和内皮细胞其他功能的控制方面具有关键作用。本研究拟:(1)探讨内皮细胞体外研究模型的选择；(2)研究VE-cadherin胞外区即外功能区脱落在内皮通透性增高中的作用；(3)检测严重脓毒症病人血清可溶性VE-cadherin(VE-cadherin外功能区)水平,并探讨其与疾病严重程度及预后的关系。　　 材料和方法：用原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为阳性对照,从蛋白水平和mRNA水平分析广泛作为内皮细胞体外研究模型的ECV304细胞系VE-cadherin的表达。以重组人基质金属蛋白酶9(rMMP-9)裂解VE-cadherin胞外区,研究VE-cadherin外功能区脱落对内皮通透性、肌动蛋白细胞骨架和RhoA的影响。收集入住SICU的重症病人28例,其中严重脓毒症15例,非脓毒症重症病人13例,健康志愿者13例。对比分析严重脓毒症血清可溶性钙黏蛋白水平,并分析和APACHEⅡ评分及死亡的相关性。内皮细胞VE-cadherin的蛋白水平检测采用免疫荧光法(IF)和免疫印迹法(WB)。VE-cadherin在mRNA水平的检测应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)。内皮通透性测定采用FITC-葡聚糖透过Transwell方法测定。肌动蛋白细胞骨架采用罗丹明-鬼笔环肽染色荧光显微镜下观察。RhoA表达以WB法检测。细胞培养液和人血清可溶性VE-cadherin检测采用酶联免疫吸附试验法(Elisa)。　　 结果：(1)已广泛用作内皮细胞体外研究模型的ECV304细胞系在蛋白水平和mRNA水平均未检测到VE-cadherin。(2)VE-cadherin外功能区脱落明显增高了内皮通透性；激活内皮细胞RhoA,引起肌动蛋白细胞骨架重组和内皮细胞间隙形成；(3)和健康志愿者及非严重脓毒症的重症病人相比,严重脓毒症病人血清可溶性VE-cadherin水平明显增高(P<0.0001)。重症病人血清可溶性VE-cadherin水平和APACHEⅡ评分呈直线相关(相关系数r=0.577,P<0.01)。严重脓毒症死亡者血清可溶性VE-cadherin水平明显高于生存者(P<0.01)。最后,我们用严重脓毒症病人血清刺激HUVEC,发现内皮细胞连接处VE-cadherin明显减少,并且VE-cadherin总量明显降低。　　 结论：(1)ECV304细胞系不表达VE-cadherin,缺乏内皮细胞重要特征,不应作为内皮细胞体外研究模型；(2)VE-cadherin外功能区脱落后可发生由外向内的细胞信号转导作用,激活RhoA,引起肌动蛋白细胞骨架重组和内皮细胞间隙形成,对内皮通透性具有重要调节作用；(3)严重脓毒症血清可溶性VE-cadherin水平明显增高,并和疾病严重程度及预后相关。