二十二碳六烯酸（DHA）是一种人体必需脂肪酸,主要以甘油三酯（TAGs）的形式存在于海洋鱼类和海洋微生物中,具有防治心血管疾病、促进大脑发育、抗炎、抗癌、改善视力等多种作用,对人体健康有着重要的影响。人体通过膳食的形式无法补充足够的DHA,因此,工业生产可服用的DHA补充剂意义重大。裂壶藻是用于工业化生产DHA甘油酯的原料之一。建立裂壶藻生产DHA甘油酯成分的定性定量分析方法、DHA甘油酯中增塑剂邻苯二甲酸二正丁酯（DBP）含量的检测方法、探究DBP迁移的因素,对工业化生产高含量、高品质的DHA甘油酯具有重要的指导意义。本论文具体研究内容如下:建立了DHA甘油酯的气相色谱（GC）分析方法。DHA甘油酯与KOH-甲醇溶液发生酯化反应生成DHA甲酯,其色谱条件为:色谱柱为Agilent HP-5（30m×0.32 mm,0.25μm）,柱温采用程序升温,进样器温度为250℃,FID检测器温度为270℃,载气氮气流速为1 m L/min。采用面积归一法定量,该分析方法快速、高效、准确性高,适用于工业生产中DHA甘油酯的定性定量分析。GC分析结果为,DHA甘油酯中二十二碳五烯酸（DPA）含量为14%,DHA含量为75%。建立了可同时测定DHA甘油酯中脂肪酸（FAs）、甘油一酯（MAGs）、甘油二酯（DAGs）和甘油三酯（TAGs）含量的反相高效液相色谱（RP-HPLC）分析方法。色谱条件为:色谱柱为Shimadzu Shim-pack GIST C18（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-水溶液,采用多级梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,检测波长为210 nm。用面积归一法定量,本方法无需样品前处理,重现性好,定性定量结果准确。建立了DHA甘油酯的反相高效液相色谱-电喷雾电离质谱（RP-HPLC-ESIMS）分析方法。色谱条件为:色谱柱为Shimadzu Shim-pack GIST C18（150 mm×2.1mm,5μm）,流动相为乙腈-水溶液,乙腈中添加10 mmol乙酸铵,采用多级梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,检测波长为210 nm。质谱条件为:正离子全扫描模式,接口电压4 k V;负离子全扫描模式,接口电压-3 k V;正离子产物离子扫描模式,碰撞能量为15 e V～35 e V。本方法重现性好,准确度高,无需标准样品和样品前处理,同时使用正、负离子全扫描模式结合正离子产物离子扫描模式,直接进样定性定量分析DHA甘油酯中FAs、DAGs、TAGs及FAs在甘油酯sn-1,2,3的位置分布。建立了DHA甘油酯中增塑剂邻苯二甲酸二正丁酯（DBP）的反相高效液相色谱-质谱联用（RP-HPLC-MS/MS）定性定量分析方法。样品经乙腈多次萃取浓缩制备。色谱条件为:色谱柱为Shimadzu GIST C18（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-水溶液,单级梯度洗脱,柱温为40℃,流速为0.3 m L/min。质谱条件为:正离子多反应监测扫描（MRM）检测,外标法定量。该法灵敏度高,准确性好,其线性相关系数为0.9994,定性限为0.18μg/L,标准加标回收率在86.31～114.08%之间,相对标准偏差（RSD）在1.70～6.10%之间。分析发现引起DHA甘油酯产品DBP升高的原因主要是生产中塑料胶管和酯化酶中DBP的迁移。避免使用塑料胶管,酯化酶经过特殊溶剂处理脱除DBP,DBP迁移率从80.42mg/kg降至8.37 mg/kg,DHA甘油酯最终产品中DBP含量小于0.11 mg/kg。