【摘 要】
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该文研究了甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multicapsid nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)的遗传异质性及其在甜菜夜蛾细胞系Se301增殖过程中的传代效应.以SeUS1为模板
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该文研究了甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multicapsid nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)的遗传异质性及其在甜菜夜蛾细胞系Se301增殖过程中的传代效应.以SeUS1为模板及合成的多聚核苷酸为引物,扩增SeMNPV PstI D片段可得到11.3kb,2.0 kb和0.7 kb三个产物,它们分别代表SeUS1的三个主要基因型.序列分析表明这三个基因型中的一个具有完整的病毒基因组,另两个为缺失/插入突变基因型.研究SeMNPV在Se301细胞无稀释连续传代过程中产生的突变体,发现包含non-hr DNA复制原点(ori)的序列在病毒增殖10代以内成为超克分子片段,同时伴随着芽生型病毒和多角体产量的显著下降.这些包含non-hr ori的片段以串联重复的形式存在.构建遗传均一的SeMNPV bacmid并利用其进行无稀释连续传代研究,证明这些串联重组片段是重新合成的.利用RecE/RecT蛋白介导的"ET重组法",在E.coli中缺失SeMNPV non-hr ori序列,由此得到的重组SeMNPV在培养细胞中增殖时病毒滴度和多角体产量保持稳定.缺损型基因组中包含的non-hr ori超克分子片段聚集似乎是传代效应的原因.该文讨论了non-hr ori的起源及其在昆虫种群内的持续性病毒感染所起的作用.推测昆虫通过遗传物质的传递,供给杆状病毒一个具有真核生物特征的DNA复制原点,即non-hr ori.Non-hr ori的迅速聚集能使DIP较正常病毒复制更迅速,从而减弱病毒对宿主的危害.
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