【摘 要】
：
禽类痛风（Gout）是由星状病毒（Astrovirus,Ast V）引起的一种以肾脏、肝脏等实质器官尿酸盐沉积和关节肿大为临床症状的疾病。Ast V是一种无囊膜、单股正链RNA病毒,因其感染宿主的多样性,不同物种感染后其主要临床症状不尽相同。到目前为止,全世界已经有许多Ast V毒株先后从不同动物中分离出来,Ast V对全球人类以及动物养殖行业均可造成极大危害。其中鹅星状病毒（Goose astr
论文部分内容阅读
禽类痛风（Gout）是由星状病毒（Astrovirus,Ast V）引起的一种以肾脏、肝脏等实质器官尿酸盐沉积和关节肿大为临床症状的疾病。Ast V是一种无囊膜、单股正链RNA病毒,因其感染宿主的多样性,不同物种感染后其主要临床症状不尽相同。到目前为止,全世界已经有许多Ast V毒株先后从不同动物中分离出来,Ast V对全球人类以及动物养殖行业均可造成极大危害。其中鹅星状病毒（Goose astrovirus,GAst V）是近些年危害国内养鹅业发展的病原,但目前国内对该病原缺乏系统的研究,而且没有有效的药物和疫苗能够对其进行防治,因此对GAst V野毒株进行分离鉴定并对其全基因组测序分析可以为其流行病学的遗传进化分析和研制预防疫苗提供一定的理论依据。在本研究中,我们从黑龙江省哈尔滨市某鹅养殖场获得疑似感染GAst V死亡雏鹅病料,对其进行处理后,在LMH细胞上以及10日龄鹅胚上进行分离培养,该毒株并不能使LMH细胞出现细胞病变,经PCR鉴定后有病毒存在。鹅胚接种病毒后,初期传代不稳定,传至5代发生胚死亡并出现明显病变,主要表现为尿囊膜增厚且泛白、胚体小且通体发红,肝脏颜色淡、发黄并且呈斑驳花纹状、股部肌肉出血。经RT-PCR鉴定表明成功分离出一株GAst V,并将其命名为GAst V HLJ株。根据NCBI Gen Bank已经上传的GAst V毒株全基因组信息,设计6对交叉重叠的特异性引物对GAst V HLJ分离株内部基因组进行扩增;同时按照5’RACE以及3’RACE试剂盒说明书扩增进而得到5’UTR和3’UTR末端序列。将获得的产物纯化回收连接到p MD18-T载体上,鉴定成功后进行测序并拼接病毒全基因组序列。GAst V HLJ株基因组全长7252 bp,基因组的结构与典型GAst V基因组结构相同,包括5’UTR-ORF1a-ORF1b-ORF2-3’UTR-poly（A）尾。基因组的两端为非编码区,内部基因包括3个开放阅读框分别为ORF1a、ORF1b、ORF2。1-245位的5’端非编码区和7028-7252位的3’端非编码区。基因组内部编码3个不同基因,246-3350位的ORF1a由3105个核苷酸组成,主要编码非结构蛋白;3341-4891位的ORF1b由1551个核苷酸组成编码Rd Rp;4910-7024位的ORF2由2119个核苷酸组成负责编码核衣壳蛋白。GAst V HLJ株ORF1a与ORF1b之间有碱基重复序列即AAAAAACTAG,ORF1b与ORF2之间有一段18 bp的不连续序列。病毒主要抗原蛋白ORF2的分子抗原性分析表明,GAst V HLJ株ORF2蛋白突变集中在3’端,其中227位、325位以及376位是其特有的突变,229位的Q突变为P、325位的A突变为T、376位的T突变为A。这可能是病毒适应新的地区及环境与气候而导致ORF2的突变。DNAStar软件分析其亲疏水性及抗原性,并利用在线软件预测发现28个抗原表位,且其抗原表位多密集分布于3’端。为了更加深入了解GAst V HLJ株的致病性,利用10日龄鹅胚繁殖的病毒对1日龄雏鹅进行颈部皮下注射感染,随后观察感染雏鹅的临床症状和病理变化。感染雏鹅在整个实验过程中临床症状表现为精神萎靡,体型瘦小,但无死亡现象。剖检时肉眼可见不同器官在不同感染日龄呈现其特有的病理变化。感染3 d后感染组胰腺较对照组发红、肿大且有疑似白色尿酸盐沉着现象;感染7 d后肝脏表面有白色物质附着;感染13 d后雏鹅脾脏呈斑驳状花纹;法氏囊在感染10 d剖检发现感染组较对照组出现表面不光滑、有白色物质附着现象。病理组织学检查表明感染后第10-13 d肾脏大部分区域肾小管上皮细胞变性坏死;肝脏可见肝细胞坏变性坏死严重并形成大的坏死灶,其内存在嗜酸性的红色颗粒,中央静脉及汇管区有大量炎性细胞浸润。实时荧光定量PCR方法对病毒在各组织脏器中的病毒进行绝对定量检测,表明在感染后的21 d内,各个器官都可以检测到病毒的存在,而且感染后期的病毒载量明显高于感染初期,其中病毒载量高峰主要集中于感染后10-13 d。肾脏的病毒载量最高,说明肾脏为星状病毒感染的主要靶器官;而肝脏病毒载量稍显减少,这可能与其发生明显的变质性变化有关。综上表明GAst V感染1日龄雏鹅动物模型建立成功,为以后对该病的防控以及疫苗的研究提供一定的理论及物质基础。
其他文献
目的 探讨股骨近端防旋髓内钉（PFNA）内固定术联合唑来膦酸治疗老年股骨粗隆间骨折的临床价值。方法 回顾性分析2018年1月～2020年12月我院收治的112例老年股骨粗隆间骨折患者，根据不同治疗方案分为对照组（56例，接受PFNA联合常规药物治疗）和研究组（56例，接受PFNA联合唑来膦酸治疗），随访1年；对比两组治疗前后骨碱性磷酸酶（BALP）、血钙（Ca）、血磷（P）、Harris髋关节功能
针对传统动态窗口法（DWA）在稠密障碍物区域存在最优路径难以选取及生成路径不平滑等问题，提出了一种改进的DWA移动机器人避障算法。基于微分流形切向量选取与障碍物不相交的机器人预轨迹，引入障碍物数量因子与方向角变化因子来改进评价函数，提高机器人在障碍物密集区域运行的安全性，使用改进后的评价函数对选取的轨迹进行评价，进而确定最优轨迹对应的速度。通过多组仿真实验对比表明：改进的DWA算法在障碍物密集区域
针对未知复杂环境下，现有多机器人系统路径规划方法存在难以处理好可达性、安全性等性能指标与求解时间之间平衡的问题，提出一种基于双层模糊推理的改进DWA（Dynamic Window Approach）算法。首先，利用线速度模糊控制器以及转向角模糊控制器输出基础位姿，保障机器人寻路过程的灵活性和安全性；然后，对传统DWA算法的障碍物距离评价函数进行改进，纳入偏离危险区评价函数，实现多机器人避碰；通过扩
根据日本制订的《防卫计划大纲》等战略文件，冷战后日本防卫政策的调整可划分为“全方位防御”构想、“多能、灵活、有效防卫力量”构想、“机动防卫力量”构想、“联合机动防卫力量”构想、“多域联合防卫力量”构想五个发展阶段。《国家安全保障战略》《国家防卫战略》《防卫力量发展计划》三个新战略文件的出台，标志着日本防卫政策展开了新一轮重大调整，其突出内容是把中国列为“前所未有的最大战略挑战”，强调要从根本上强化
该文通过CiteSpace可视化软件对2010年以来的中国知网（CNKI）中高校创新创业教育相关文献进行分析。研究结果发现，我国高校创新创业研究总体呈上升趋势，研究日益成熟，研究领域聚类结构显著，研究内容较为丰富，研究主题之间联系紧密，逻辑关系合理。研究可以分为理论探索研究阶段和实践融合研究阶段，目前的研究前沿主要集中于互联网+、新工科和产教融合等方面。
＜正＞工作第一年，我指导学生开展“三下乡”暑期社会实践。第一次组织学生集中前往距离学校一千多公里的村子进行为期10天的活动，在写申报书的时候没有任何可参考的资料。2018年从学校毕业就进入了另一所学校工作，一直没有离开过象牙塔的我，天真得带着几分傻气。当时以为就一直待在学校了，没想到会因为从事团的工作和“三下乡”社会实践活动结下不解之缘。
＜正＞当前,高校大学生的就业形势比较严峻,为解决大学生就业问题,我国早已提出了"大众创业、万众创新"政策,在国家发展战略层面上大力鼓励大学生创新创业,鼓励大学生运用自己的创新创业成果服务国家经济建设和乡村振兴。为此,高校在思政课教学过程中也开始融入创新创业教育,打造具有时代性的思政理论教育课程,从而有效推动高校创新创业教育与思政教育的深度融合。新形势下的思政教育工作是创新创业教育的有效载体,它能增
深化高校创新创业教育改革，是推动国家创新、提升经济效益、推进高等教育事业持续发展以及保证毕业生高质量就业的重要举措。“互联网+”为高校创新创业教育改革指明了方向，也为之提供了发展契机。文章通过对高校双创教育中存在的问题进行了解与分析，分别从三个方面提出了优化策略：一是更新创新创业教育理念、合理设置创新创业教育课程；二是构建教学新体系；三是强化创新创业教育保障体系，完善管理机制，从而完善相关的条件与
训练评估学是利用军事评估学基本原理和方法研究训练评估现象和评估问题，揭示训练评估规律的一门学科。依据独特性、抽象性、稳定性、区分性原则，确定训练评估学的研究对象为训练评估活动及其运动规律。训练质效是训练评估学理论体系构建的逻辑起点。
文学与绘画的某些门类在发展的过程中，更容易形成跨媒介的钩联与融通。宋代闺怨仕女画与诗词的同意象互文互构，既是长期以来文学对绘画的强势影响所致，也是宋代细腻婉约的时代文艺风格使然。本文以《绣栊晓镜图》和《妆靓仕女图》为例，以画中的水意象为切入点，挖掘宋代闺怨仕女图中水意象牵引下的诗性隐喻与隐性叙事，探索宋代仕女画中隐含的时代文艺精神。