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目的1.建立高效液相色谱-离子淌度飞行时间串联质谱法（high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS）同时测定血浆中毛蕊花糖苷（verbascoside,VB）及其主要 代谢产物羟基酪醇（hydroxytyrosol,HT）和咖啡酸（caffeic acid,CA）的方 法,比较灌胃给予VB后,VB及其主要代谢产物HT和CA在常氧及缺氧大鼠体内血浆动力学的差异。2.建立高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography,HPLC）同时测定大鼠组织中VB及其主要代谢产物CA的方法,比较灌胃给予VB后,其药物原型与代谢产物CA在常氧及缺氧大鼠体内组织分布的差异。3.建立HPLC法测定大鼠尿液及粪便中VB的方法,比较VB在常氧及缺氧大鼠体内的排泄动力学特征。4.建立HPLC-超滤法测定VB血浆蛋白结合率的方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中VB蛋白结合率的异同。方法1.采用中压柱层析法从肉苁蓉总苯乙醇苷提取物中分离得到VB单体化合物。将14只Wistar雄性大鼠随机分为常氧组和缺氧组,每组7只。常氧组饲养于兰州（海拔1500 m）的常氧环境,缺氧组置于低压低氧动物实验舱中（拔7500 m）进行缺氧暴露;常氧及缺氧大鼠经灌胃给予300 mg·kg-1VB后,于不同时间点从眼眶静脉丛采血,采用HPLC-QTOF-MS法检测血浆中VB、HT及CA的浓度,并用DAS 2.0计算药代动力学参数,比较VB及其代谢产物HT和CA在常氧及缺氧大鼠体内药代动力学参数的差异。2.将42只Wistar健康雄性大鼠随机分为常氧30 min组、常氧60 min组、常氧90 min组和缺氧30 min组、缺氧60 min组、缺氧90 min组,每组7只。灌胃给予300 mg·kg-1VB后,于30、60和90 min采集大鼠心、肝、脾、肺、肾、大脑、心、肌肉、大肠、小肠和胃等组织,采用HPLC法检测各组织中VB及CA的浓度,比较VB及其代谢产物CA在常氧及缺氧大鼠体内组织分布的差异。3.将14只Wistar雄性大鼠随机分为常氧组和缺氧组,每组7只。将VB 300mg·kg-1单剂量灌胃给予常氧及缺氧大鼠后,采用HPLC测定给药后不同时间段大鼠排泄的尿液、粪便样品中VB含量,绘制其累积排泄速率时间曲线,比较VB在常氧及缺氧大鼠体内的排泄特征。4.将12只Wistar雄性大鼠随机分为常氧组和缺氧组,每组6只。采集常氧及缺氧大鼠空白血浆,分别配置含VB低、中、高浓度(3、6、12mg·m L-1)的常氧及缺氧大鼠血浆样品。采用超滤法处理样品,结合HPLC法测定常氧及缺氧大鼠血浆中VB游离型药物浓度（Cf）和总药物浓度（Ct）,并考察超滤膜非特异性结合率（NSB）,对Cf进行矫正后,计算血浆蛋白结合率。结果1.相比常氧大鼠,缺氧大鼠血浆中VB的AUC（0-t）、AUC（0-∞）和Cmax显著降低（P＜0.05）,分别是常氧大鼠的0.50、0.52和0.45倍;Tmax和Vz/F显著升高（＜0.05）,分别是常氧大鼠的2.17和2.14倍。缺氧大鼠血浆中CA的AUC（0-）t、AUC（0-∞）和Cmax显著降低（P＜0.05）,分别是常氧大鼠的0.60、0.74和0.55倍;MRT（0-∞）、Tmax和Vz/F显著升高（P＜0.05）,分别是常氧大鼠的1.57、2.86和1.90倍。常氧及缺氧大鼠血浆中均未检测到HT。2.在常氧及缺氧大鼠消化系统中,VB在小肠中含量最高(峰药浓度Cmax为259.13μg·m L-1),胃和大肠含量相对较低(Cmax分别为92.13和20.58μg·m L-~1);其他组织中主要分布于肌肉(Cmax为657.38 ng·m L-1)和肺(Cmax为346.06ng·m L-1),在大脑和其他组织中有少量分布,峰药浓度均低于107 ng·m L-1。VB在缺氧大鼠血浆及心、肝、脾、肺、肾等组织中浓度低于常氧大鼠。除60min肝、脾、肺及90 min肝外,各时间点缺氧大鼠心、肝、脾、肺、肾、大脑和肌肉中VB浓度与血浆中VB浓度的比值均大于常氧大鼠。常氧大鼠在30 min时,VB在血浆及各组织中浓度均达到最高,且在30～90 min均内呈递减趋势。缺氧大鼠血浆、肺、大脑、胃和大肠中VB的浓度随时间的变化与常氧保持一致,在30 min达到最高,在30～90 min内均呈递减趋势;但小肠、心、肝、脾、肾和肌肉中VB浓度在60 min时达到最高,在30～90 min内先升高后下降的趋势。3.大鼠经灌胃给予VB后,常氧大鼠36 h内尿累积排泄率为0.026%,缺氧大鼠为0.069%;常氧大鼠粪便累积排泄率为2.875%,缺氧大鼠为11.958%。4.大鼠血浆中VB浓度为3、6、12mg·m L-1时,VB与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（62.02±8.51）%、（60.17±5.59）%和（62.60±3.77）%;与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（32.79±4.20）%、（33.16±1.74）%和（32.72±2.20）%,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论1.在缺氧条件下,VB在大鼠体内吸收速度减慢,吸收强度减弱,代谢减慢。2.VB主要吸收部位为小肠,可经过血脑屏障进入大脑,在肌肉和肺中分布较多,其他组织有少量分布。相比常氧大鼠,VB在缺氧大鼠组织中体现为分布减少和减慢,进入体循环的VB分布至组织的相对比例增加。3.VB在尿液和粪便中的累积排泄率低,仅有小部分VB以原型药通过粪便和尿液排泄,大部分VB在大鼠体内转化为其他形式;相比常氧大鼠,缺氧能加速VB的粪便及尿排泄。4.VB与常氧大鼠血浆蛋白属于中度结合,且在研究的浓度范围内,不具浓度依赖性,而VB与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于与常氧大鼠血浆。