从猪带绦虫六钩蚴中提取总RNA,用Oligo软件设计TSOL16基因特异性引物,通过RT-PCR扩增出559bp的片段,扩增产物连接到pMD18-T载体中,经酶切鉴定、PCR分析和测序后证明,所克隆的559bp片段含TSOL16蛋白基因完整的开放阅读框(ORF),其核苷酸序列及其编码的氨基酸序列与Genebank登录的TSOL16基因相应序列的同源性分别是99%和97%。参照已测序的TSOL16基因的核酸序列,用Oligo软件设计一对去信号肽且带EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的原核表达引物,PCR扩增及电泳回收,将PCR产物和原核表达载体pGEX-4T-1分别用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,克隆TSOL16基因至原核表达载体pGEX-4T-1中,转化到大肠杆菌BL21,经酶切、PCR和测序鉴定证明,TSOL16基因正确插入到pGEX-4T-1载体。用ITPG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western-blotting分析证实TSOL16基因在BL21中成功表达,目的基因与GST以融合形式表达,分子量大小为40ku左右,能被猪带绦虫六钩蚴阳性血清所识别;将表达产物免疫小鼠,进行间接ELISA检测,其抗血清能与猪囊虫粗抗原及纯化的TSOL16重组融合蛋白产物发生免疫学反应。本研究克隆了猪带绦虫六钩蚴TSOL16基因,在原核表达系统中进行了表达,证实其表达产物具有免疫原性,从而为猪囊虫基因工程疫苗研制、基因结构与功能研究提供了理论依据和实验材料。