【摘 要】
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我国是桃树原产国,也是世界第一产桃大国。近年来,非生物胁迫已成为限制桃产业发展的重要因素。TST糖转运蛋白家族主要参与植物生物与非生物胁迫应答及生长发育等多种生理过程,但桃中TST糖转运蛋白的生物学功能尚未可知。我们克隆了PpTST2-T基因并进行生物信息学分析,随后检测了逆境条件下该基因表达量,发现干旱、盐、高温和ABA都能诱导PpTST2的表达,然后以野生型番茄和35S:PpTST2-T转基因
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我国是桃树原产国,也是世界第一产桃大国。近年来,非生物胁迫已成为限制桃产业发展的重要因素。TST糖转运蛋白家族主要参与植物生物与非生物胁迫应答及生长发育等多种生理过程,但桃中TST糖转运蛋白的生物学功能尚未可知。我们克隆了PpTST2-T基因并进行生物信息学分析,随后检测了逆境条件下该基因表达量,发现干旱、盐、高温和ABA都能诱导PpTST2的表达,然后以野生型番茄和35S:PpTST2-T转基因植株为材料,对干旱胁迫下的生长状态和生理指标进行测定分析。另外,通过酵母单杂实验和双荧光素酶实验证明Pp ABRE1能够激活PpTST2的表达。主要结果如下:（1）PpTST2-T与拟南芥TST家族的At TST1、At TST2属于一个亚家族,氨基酸序列相似性表明At TST2与PpTST2-T氨基酸相似度最高。PpTST2的c DNA序列总长为2220bp,编码740个氨基酸,预测编码蛋白质分子量为78.91 k Da,等电点为4.8。对启动子元件进行分析发现其具有干旱胁迫、激素响应、光反应和糖响应等多种功能元件。（2）克隆PpTST2-T基因并对其进行表达特异性分析,发现PpTST2在各组织中均有表达,其在中花和果肉中表达量较高,果皮、叶中次之。干旱、盐、高温和ABA处理均会诱导PpTST2基因的表达。（3）利用q RT-PCR技术及PCR技术分别鉴定出2种转基因品种共5个株系的35S:PpTST2-T转基因番茄植株及3个株系的转基因苹果愈伤。过表达PpTST2-T提高了苹果愈伤的可溶性糖含量。随后我们检测了其葡萄糖、果糖和蔗糖的含量,其含量均升高。转基因番茄比野生型生长更快、提早开花、叶片和果实的糖含量更高、果实有机酸含量下降、种子千粒重升高。（4）对过表达PpTST2-T番茄株系和野生型进行干旱胁迫,发现转基因番茄有更好的耐旱性,然后测定叶绿素、丙二醛、叶片相对电导率、游离脯氨酸、可溶性蛋白以及抗氧化酶活性等逆境生理指标,结果显示干旱处理后野生型番茄植物体内丙二醛含量和相对电导率含量更高,而转基因番茄植物体内叶绿素含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量及POD活性更高,这表明过表达PpTST2-T基因提高了番茄对干旱的耐受性。（5）酵母单杂实验鉴定得到Pp ABRE1能够激活PpTST2的表达,利用双荧光素酶实验进一步确定了Pp ABRE1能够激活PpTST2的表达。
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