乳酸菌作为一种益生菌,其在工业、农牧业、食品发酵工业、医药等领域内被广泛应用。因此,本实验筛选并鉴定一株具有广谱抑菌作用并能够分泌ClassⅡ细菌素的乳酸菌,筛选出能够促进ClassⅡ细菌素分泌的影响因素,从而得到该菌株的最佳发酵条件。具体试验如下:1.ClassⅡ细菌素乳酸菌的筛选、鉴定及ClassⅡ细菌素分离纯化通过牛津杯法、最小抑菌浓度实验（MIC）和实验16s RNA分子鉴定能够分泌细菌素乳酸菌菌株,并通过对两株指示菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果判断其是否具有广谱抑菌作用,挑选出抑菌效果最佳的菌株。16S r RNA分子鉴定结果表明L-4为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,数据库编号为KU572436.1,通过PCR和琼脂糖凝胶电泳证明该菌株具有能够分泌ClassⅡ细菌素的群体感应系统。细菌素初提液采用超滤系统按分子量大小分离细菌素,再通过超高效液相进行分离纯化,并通过尿素-sds-page电泳测定ClassⅡ细菌素分子量大小为10KDa。2.Tween80,MgSO4和EDTA对L-4细菌素表达调控的影响向MRS培养基中添加不同浓度的Tween80,MgSO4和EDTA,通过牛津杯法和MIC实验检测其对细菌素抑菌活性影响;通过荧光定量PCR检测其对ClassⅡ细菌素转运蛋白plnABC表达调控影响。发现在培养基中分别添加0.3%Tween80、0.35g/L MgSO4、0.8m M EDTA三种物质对细菌素转运蛋白plnABC的表达具有不同程度的促进作用。其中EDTA对转运蛋白plnABC表达作用影响最显著。3.产ClassⅡ细菌素发酵条件的优化通过发酵时间、发酵pH值和发酵温度三个单因素实验对细菌素抑菌效果的影响,通过响应面法优化发酵条件,从而得到植物乳杆菌L-4最佳培养条件。植物乳杆菌L-4最佳发酵条件为:培养温度:37℃;培养时间:18 h;培养基pH:4.5。通过Tween80、MgSO4和EDTA对乳酸菌L-4的MIC和抑菌圈直径的影响,结果表明0.8m M EDTA加入MRS培养基培养植物乳杆菌L-4后对两株指示菌产生的最大抑菌圈直径分别为21.57±0.51mm和21.62±0.45mm,MIC为28mg/m L。最佳发酵条件下培养基中添加0.8m M EDTA的植物乳杆菌L-4产生最佳抑菌效果,其对大肠杆菌产生的抑菌圈直径为21.56mm。