近年来,伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)变异株的出现导致原有病毒疫苗的保护力下降,国内猪场伪狂犬病不断爆发,对养猪业造成了巨大的经济损失。本研究以PRV变异株(LY-2015)与经典株(Halv)为研究对象,滴鼻感染成年健康昆明鼠。通过免疫组织化学染色、原位杂交染色、PCR技术结合组织病理学技术,研究病毒在小鼠脑内的分布。同时通过不同时间点小鼠脑内病毒的分布差异分析PRV滴鼻感染小鼠后的上行传导通路,以填补变异株PRV感染小鼠后病毒在脑内分布相关研究的空白,并为临床上PRV的诊断与精确的阻断病毒传播提供基础资料。论文主要研究内容如下:1病毒感染小鼠后的临床症状在2,000TCID50的LY-2015株PRV感染组,小鼠在病毒感染48h后开始出现被毛粗乱、食欲不振;在病毒感染60h后,小鼠表现出精神振奋,抓挠头面部皮肤;病毒感染84h后,多数小鼠因瘙痒抓挠致皮肤破溃,小鼠死亡。用相同感染量的Halv株PRV滴鼻感染小鼠时,未见任何临床症状。在10,000TCID50的Halv株PRV感染组,小鼠在病毒感染72h后开始出现与LY-2015株PRV感染组相似的临床症状;在病毒感染96h后,大量小鼠死亡。结果表明LY-2015株PRV毒力较Halv株PRV强。2病毒感染后的上行传导通路LY-2015株PRV感染小鼠后,病毒首先出现在鼻黏膜下层细胞内,然后在三叉神经相关神经核团、交感神经相关神经核团、面神经相关神经核团内均检测到PRV。表明变异病毒LY-2015株PRV滴鼻感染小鼠后可沿三叉神经、交感神经与面神经通路上行传导,致中枢感染。Halv株PRV滴鼻感染小鼠后,在三叉神经相关核团、交感神经相关核团、副交感神经相关核团与面神经相关核团内检测到PRV。说明经典病毒Halv株PRV滴鼻感染小鼠后可沿三叉神经、交感神经、副交感神经和面神经上行传导。3病毒感染小鼠后在脑内的分布2,000TCID50的LY-2015株PRV感染小鼠后,病毒多分布于脊髓,脑桥和延髓,大脑内仅在丘脑可见少量病毒。在病毒感染84h后,小鼠脑内的病毒分布最为广泛。10,000TCID50的Halv株PRV感染组,病毒不仅分布于脊髓、脑桥和延髓,大脑中也存在多量病毒。病毒感染小鼠96h后在脑内的分布最为广泛。结果表明,经典病毒Halv株PRV感染小鼠后沿轴突上行传导较变异病毒LY-2015株PRV慢;且LY-2015株PRV的毒力较强,小鼠在病毒感染后过早死亡,仅少量病毒传导至中枢,分布于下丘脑外侧部、丘脑下中间核腹侧部等。此外,在2,000TCID50的LY-2015株PRV感染组,小鼠在病毒感染后120h,IHC染色呈PRV阴性,但ISH染色呈PRV阳性,结果表明小鼠脑内存在病毒基因,但病毒未复制。结果表明,感染PRV后,耐过小鼠呈隐性感染,病毒基因整合于小鼠外周神经细胞核内,但不复制产生新的病毒病毒粒子。以上结果表明,LY-2015株PRV毒力强于Halv株PRV;Halv株PRV只有在高病毒滴度下才能造成小鼠的有效感染。滴鼻感染昆明鼠造成有效感染时,变异病毒LY-2015株PRV感染小鼠后沿三叉神经、交感神经与面神经上行传导,但病毒粒子多分布于延髓和脑桥;经典病毒Halv株PRV感染小鼠后可沿三叉神经、交感神经、副交感神经与面神经上行传导,在小鼠脊髓、脑桥、延髓和大脑中均存在多量的病毒分布。在有效感染中耐过小鼠呈潜伏性感染,不表现出任何临床症状,病毒基因整合到小鼠外周神经细胞核中,但不复制。