本论文包括三个实验，分别研究了肠型点状气单胞菌的分离和鉴定、半致死浓度的确定、肠型点状气单胞菌微粒的制备和肠型点状气单胞菌微粒对草鱼的免疫保护效应。在实验过程中，首先进行了发病草鱼病原菌的分离、纯化、鉴定，确定了病原菌的半致死浓度，为下一步的免疫保护效应做准备；在微粒制备实验中，通过复乳溶剂挥发法制备疫苗微粒，采用对比实验确定适合草鱼摄食的微粒直径的实验条件；研究的关键是确定制备的疫苗微粒能否起到保护的作用，主要通过两种方法来判定：第一，免疫进行过程中，不同时间段提取免疫草鱼的血清，采用酶联免疫吸附法测定抗体的滴度大小，初步确定是否能够引起草鱼的免疫应答。第二，通过草鱼的保护实验确定保护率，为今后口服疫苗的大规模应用提供依据。1、肠型点状气单胞菌的分离、鉴定、半致死浓度的确定首先，分离、纯化濒临死亡的患病草鱼的致病菌，然后通过生化细菌鉴定管鉴别该细菌的种类，结果表明该细菌为肠型点状气单胞菌，设计不同的细菌浓度梯度注射草鱼，获得肠型点状气单胞菌对草鱼的LC₅₀为10^6.2CFU/ml。2、肠型点状气单胞菌口服疫苗微粒的制备实验采用复乳溶剂挥发法制备口服疫苗微粒，通过考马斯亮蓝法测定微粒的的蛋白质含量，进而确定微粒的载药量和包封率。考察聚乙烯醇溶液浓度、聚丙烯酸树脂浓度、二氯甲烷/聚乙烯醇溶液体积比以及不同匀浆转速对微粒粒径、载药量、包封率的影响。通过实验结果得出肠型点状气单胞菌口服疫苗制备条件为：聚乙烯醇溶液浓度为6％，聚炳烯酸树脂的浓度为60 mg/ml，超声功率为400 w，匀浆转速为9500 r/min，可以保证微粒的直径为10μm左右。同时菌体疫苗微粒的蛋白质含量分别为6.32％；蛋白质包裹效率为62.35％。体外释放实验表明微粒具有缓释作用，达到实验要求的标准。3、肠型点状气单胞菌微粒对草鱼的免疫保护效应采用注射全菌疫苗组、佐剂疫苗组和通过制成饲料口服投喂疫苗微粒方法分三次免疫健、康草鱼，在第一次免疫后的不同时间段测定草鱼的抗体滴度，结果显示：全菌疫苗微粒组、佐剂疫苗组和口服疫苗组均可检测到明显的血清抗体，但三种疫苗的免疫原性的强弱有所不同，佐剂疫苗组的抗体水平明显高于其它2组（P<0.05），其次为全菌疫苗组。同时结果表明口服疫苗组的抗体滴度随着时间的推移下降幅度低于其他两组，说明口服疫苗具有缓释的作用。保护实验显示：全菌疫苗微粒组、佐剂疫苗组、口服疫苗组和对照组的存活率分别为55％、75％、37.5％及7.5％，根据各组草鱼的存活率、平均存活时间进行分析，发现全菌疫苗、佐剂疫苗和口服疫苗均对草鱼具有保护效应，与对照组相比，差异有显著性（P<0.05）。