【摘 要】
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番茄青枯病(Bacterial wilt)是常见的土传病害,具有传染性强、难以根除的特点。采用抗病砧木进行嫁接栽培是防治番茄青枯病的最有效手段。研究证明,抗病砧木提高嫁接番茄对青枯病的抗性与根系分泌物和根际微生物密切相关。本研究以两种高抗青枯病砧木(No.21、No.1)和高感青枯病番茄(Fb)的砧穗嫁接苗、接穗自嫁接苗为材料,通过GC-MS技术对接种青枯菌(Ralstonia solanacea
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番茄青枯病(Bacterial wilt)是常见的土传病害,具有传染性强、难以根除的特点。采用抗病砧木进行嫁接栽培是防治番茄青枯病的最有效手段。研究证明,抗病砧木提高嫁接番茄对青枯病的抗性与根系分泌物和根际微生物密切相关。本研究以两种高抗青枯病砧木(No.21、No.1)和高感青枯病番茄(Fb)的砧穗嫁接苗、接穗自嫁接苗为材料,通过GC-MS技术对接种青枯菌(Ralstonia solanacearum)后的植株根系分泌物进行组分鉴定分析,筛选出新的抗病活性物质;用单一、混合的活性物质对高感青枯病的番茄植株进行灌根处理后接种青枯菌,利用稀释平板法分离不同处理的根际微生物,结合高通量测序分析根际微生物的多样性,探讨抗病砧木嫁接植株的根系分泌物主要活性物质提高番茄抗青枯病的机理,为利用根系分泌物活性物质防治青枯病提供理论依据,为开发防治青枯病的植物源新药剂提供参考。研究结果如下:1.收集浓缩番茄砧穗嫁接和自根嫁接植株的根系分泌物,通过GC-MS测定分析,结果显示接种青枯菌后,抗病砧木嫁接植株根系分泌物中的邻苯二甲酸二甲酯(DP)和2,6-二叔丁基对甲苯酚(BHT)的相对含量升高,而感病接穗自根嫁接植株根系分泌物中的这两种物质相对含量则降低,结合青枯菌平板抑菌实验,推测这两种物质与番茄嫁接植株抗青枯病相关。2.设计DP、BHT不同浓度单因素和双因素试验,对番茄(Fb)自根苗进行灌根处理后接种青枯菌,研究两种物质对番茄青枯病的防病效果。单因素试验结果表明,高浓度(1.0、2.0mmol/L)灌根处理后的植株发病率和病情指数均显著低于未灌根处理植株(CK),其中2.0mmol/L的DP处理效果最好,发病率和病情指数分别为57.7%和48.9。双因素试验结果表明,两种物质混合灌根处理比单一活性物质处理的防病效果更佳,其中浓度均为1.0mmol/L的混合处理效果最好,青枯病发病率46.7%、病情指数42.5,显著低于单一物质处理。说明DP、BHT是抗病砧木嫁接番茄根系分泌物中具有抗青枯病作用的两种活性物质。3.用两种活性物质对番茄(Fb)进行灌根处理,采样接种青枯菌前后的根际基质,利用稀释平板法测定根际可培养微生物数量,分析灌根处理对根际微生物数量的影响。接种青枯菌前,两种活性物质处理的植株根际细菌、真菌的数量均显著低于去离子水处理(CK),其中浓度1.0 mmol/L的DP处理最低,细菌数量78.93×10~6cfu/g、真菌数量0.51×10~6cfu/g。接种青枯菌后,两种活性物质处理的植株根际细菌、放线菌数量均显著低于CK,DP处理的根际真菌数量较接种青枯菌前显著增加;两种活性物混合(1.0 mmol/L DP+1.0 mmol/L BHT)处理的根际细菌数量(53.6×10~6cfu/g)显著低于CK。说明抗病砧木根系分泌物活性物质通过抑制根际细菌,调节根际真菌、放线菌数量提高番茄植株对青枯病的抗性。4.高通量测序结果显示,接种青枯菌前后,两种活性物质混合液(1.0mmol/L DP+1.0 mmol/L BHT)处理的根际细菌多样性和丰度均显著低于去离子水处理(CK);接种青枯菌后,根际真菌丰度显著高于CK。分析微生物种群组成及其功能,发现两种活性物质混合液处理的根际细菌物质合成和能量代谢比其他处理活跃,养分利用和拮抗青枯菌的微生物相对丰度高于CK。说明抗病砧木根系分泌物通过改善根际微环境及微生物代谢提高嫁接番茄对青枯病的抗性。
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