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目的:研究α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)对高糖环境下人外周血红细胞膜结构的保护作用,并探讨这一功能是否与其改善高糖环境所诱导的氧化应激及增强红细胞的抗氧化能力有关。 方法:用50mM葡萄糖处理人外周血红细胞来模拟人体高血糖环境,加入ALA使其终浓度分别为50μM,100μM和200μM预干预,37°C培养24h,观察ALA对高糖环境下红细胞的保护作用,并用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,用液相色谱-质谱联用法(liquid chromatography/mass spectrometry,LC/MS)检测还原型谷胱甘肽(glutathione reduced,GSH)/氧化型谷胱甘肽(glutathione oxidized,GSSG)含量,用流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测膜的磷脂不对称性,用超扫描电子显微镜(ultra scanning electron microscopy,USEM)检测红细胞膜的形态,用气相色谱法(gas chromatography,GC)检测红细胞膜的脂肪酸组成。 结果: 1.50mM葡萄糖组MDA的产生量较PBS组显著升高,分别为4.16±0.62nmol/ml和0.2±0.01nmol/ml(P<0.01)。与50mM葡萄糖相比,50μM,100μM和200μMALA组的MDA产生量均显著降低(P<0.01)。 2.PBS组的GSH含量较50mM葡萄糖组显著升高,分别为2416.25±147.35nmol/gHb和830.82±96.76nmol/gHb(P<0.01)。与50mM葡萄糖相比,50μM,100μM和200μMALA组的GSH含量均显著升高(P<0.01)。 50mM葡萄糖组的GSSG含量较PBS组显著升高,分别为181.74±9.77nmol/gHb和21.74±3.14nmol/gHb(P<0.01)。与50mM葡萄糖相比,50μM,100μM和200μMALA组的GSSG含量均显著降低(P<0.01)。 3.50mM葡萄糖组的FITC探针标记率较PBS组高显著升高,分别为13.95±1.66％和1.13±0.17%(P<0.01)。与50mM葡萄糖相比,50μM,100μM和200μMALA组的FITC探针标记率均显著降低(P<0.01)。 4.50μMALA组对高糖环境下的红细胞膜有轻微的影响,其膜上仍有许多凸起。100μM和200μMALA组的红细胞膜上的凸起比50μMALA组少。50μM,100μM和200μMALA组以及PBS组的红细胞形态比50mM葡萄糖组的更正常。 5.PBS组红细胞膜的C18:0含量较50mM葡萄糖组显著降低,分别为25.5±1.7%和44.3±3.9%(P<0.01)。 与50mM葡萄糖组相比,50μM,100μM和200μMALA组红细胞膜的C16:0、C18:0和C18:1的含量均显著降低(P<0.05)。 与50mM葡萄糖组相比,50μM,100μM和200μMALA组红细胞膜的C22:0、C22:5和C22:6的含量均显著升高(P<0.05)。 PBS组红细胞膜的FAME含量较50mM葡萄糖糖组显著升高,分别为4.1±0.7和0.9±0.1pmol/mgHb(P<0.01)。与50mM葡萄糖组相比,50μM、100μM和200μMALA组红细胞膜的FAME含量分别显著升高0.8、1和1.2倍(P<0.01)。 结论:高糖影响人外周血红细胞膜,ALA可能通过改善红细胞内氧化应激状态、提高红细胞的抗氧化能力而保护红细胞膜脂质的不对称分布,使棘红细胞的出现减少,提高红细胞膜不饱和脂肪酸的含量,进而可能增强膜的流动性。ALA保护红细胞的结构和功能,进而可能对糖尿病及其并发症的形成起到了预防保护作用。