【摘 要】
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目的：探讨经聚乙烯亚胺修饰的纳米羟基磷灰石-P53复合物转染鼻咽癌细胞(HNE2系)的效果。方法：(1)构制pEGFP-C1-P53质粒；(2)用pEGFP-C1-P53质粒和经聚乙烯亚胺修饰的纳米羟基磷灰
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目的：探讨经聚乙烯亚胺修饰的纳米羟基磷灰石-P53复合物转染鼻咽癌细胞(HNE2系)的效果。方法：(1)构制pEGFP-C1-P53质粒；(2)用pEGFP-C1-P53质粒和经聚乙烯亚胺修饰的纳米羟基磷灰石(简称：PEI-nHA)混合制成羟基磷灰石-P53复合物,用于鼻咽癌HNE2系细胞的转染；然后检测转染后的鼻咽癌HNE2细胞中P53转染效率。(3) RT-PCR和Western-blot实验检测纳米羟基磷灰石和脂质体2000介导P53基因在基因和蛋白质水平的表达。结果：(1)在转染实验中转染后的空白组(单纯质粒和HNE2细胞混合)在荧光显微镜下检测未见荧光,脂质体2000组在荧光显微镜下检测可见40%左右细胞内具有绿色荧光,纳米载体组分成62.5ug/ml、125ug/ml、250ug/ml、500ug/ml四种浓度转染,在荧光显微镜下检测经四种不同浓度纳米材料介导转染HNE2细胞后,62.5ug/ml浓度的PEI-nHA转染效率约为4%,125 ug/ml浓度的PEI-nHA转染效率约为6%,250ug/ml浓度的PEI-nHA转染效率约为5%,500 ug/ml浓度的PEI-nHA转染效率约为1%。(2) RT-PCR和Western-blot实验经脂质体2000、纳米羟基磷灰石介导转染进鼻咽癌HNE2细胞均可检测到P53在基因和蛋白水平的表达,经脂质体2000介导转染的HNE2细胞的P53基因和蛋白表达水平较纳米羟基磷灰石载体介导的明显增强。结论：(1)经聚乙烯亚胺修饰的纳米羟基磷灰石介导转染鼻咽癌HNE2细胞的转染率较脂质体2000偏低,有待进一步研究。
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