癫痫是一类脑部神经疾病,由脑内神经元异常超同步化放电引起。从脑损伤等初步事件发生到慢性自发发作行为的出现,这一段潜伏期称为癫痫发生。癫痫发生的病理机制至今尚不明确,其治疗基本上还处于慢性反复发作期的治疗,尚无针对其发生机制的有效治疗手段。本课题通过组学测序方法检测癫痫发生早期的癫痫模型鼠海马样本中表达发生变化的各类基因,深入探究有效抑制癫痫发生的手段及其分子机制。我们使用PILO癫痫模型小鼠癫痫发生早期的海马组织,以及RNA-sequencing技术平台进行研究,发现大部分炎症因子相关的基因在癫痫模型组显著性变化。进行组学测序软件IPA分析后,初步筛选出与研究课题相关性较高的基因及通路,并在mRNA和蛋白水平进行逐步验证,最终确认了CD44和SERPINE1两个基因在mRNA和蛋白水平上都有显著性上调。另外,通过分析软件筛选及文献查阅发现,这两个基因都与TGF-β通路相关,且位于不同的调节位置等级:CD44为胞浆中上游调控因子,SERPINE1为细胞核内下游效应因子。因此尝试抑制CD44表达,进一步研究该条件下SERPINE1的表达变化以及癫痫样行为和神经元凋亡等指标,以明确CD44及SERPINE1在癫痫模型组癫痫发生早期的具体作用,从机制上探究癫痫发生早期干预治疗的有效途径。同时,本课题在实验室已有的数据基础上,进一步探索了NAD~+干预对PILO癫痫模型鼠癫痫早期发生的治疗和分子机制。我们检测了凋亡相关的乙酰化p53及其去乙酰化酶SIRT1的变化,发现NAD~+干预抑制了癫痫发生早期海马内p53的乙酰化,使其恢复至正常水平,但未能恢复SIRT1的降低。以上结果说明NAD~+可能通过不依赖于SIRT1的机制抑制p53的乙酰化,从而阻碍癫痫的早期发生。今后我们还将针对NAD~+抑制p53的乙酰化的机制进行深入探究。同时,本课题也尝试运用小RNA水平的组学测序技术,检测了癫痫发生早期小RNA表达的变化,探究从小RNA与mRNA作用的转录后修饰干预癫痫发生的可能性。