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目的：利用Sombati细胞模型制造癫痫样放电神经元，研究Sombati细胞模型中神经元TLR4表达变化，探讨TLR4在Sombati癫痫细胞发病过程中的意义。方法：分离SD乳鼠海马，海马神经元体外细胞培养，倒置显微镜观察体外海马神经元的形态学变化，计算细胞存活率，采用NSE鉴定神经元。将培养至第9天的海马神经元随机分成两组：(1)Sombati细胞模型组：去除维持培养液，低镁细胞外液处理3小时，恢复维持培养液继续培养。(2)对照组：去除维持培养液，正常细胞外液处理3小时恢复继续维持培养液培养。利用免疫组化和荧光定量PCR技术检测神经元细胞中TLR4蛋白和基因的表达。结果：(1)培养第9天的海马神经元胞体丰满、网络稠密，生长状况良好；细胞存活率80.6%，生长稳定，细胞纯度大于80%。(2)免疫组化显示对照组的TLR4蛋白表达为阴性，模型组可见不同程度的TLR4阳性细胞表达,各组AOD值：对照组(0.014±0.002)，造模12h组(0.065±0.023)，造模24h组(0.209±0.023)。造模后12h及24h组与对照组比较差别显著(P＜0.05)，造模12h组与24h组比较差别显著(P＜0.05),随时间推移TLR4的蛋白表达越明显。(3)大鼠海马神经元TLR4基因的表达:荧光PCR结果显示模型组TLR4mRNA表达量较对照组表达上调。各组表达量：对照组(1.03±0.26)，造模12h组(1.34±0.17)、造模24h组(2.01±0.07)，组间比较均有显著差异(P＜0.05)，随时间推移TLR4的基因表达越明显。结论：(1)单独培养不同个体的SD乳鼠海马神经元，所得细胞纯度高，活性好。(2)TLR4的蛋白和基因表达随着癫痫细胞放电时间的延长而增强，可能与癫痫的发病有关