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目的:探讨环孢霉素A是否可以抑制结膜干燥症实验鼠模型的结膜上皮细胞的凋亡。
方法:30只C57BL6小鼠皮下注射东莨菪碱12天制造结膜干燥症模型鼠,10只为干眼对照组不使用局部治疗,10只小鼠使用1μL0.05%环孢霉素A(CsA)滴眼每日三次(干眼+CsA组),10只小鼠使用1μL蓖麻油滴眼每日三次(干眼+载体组)。另取10只为正常组,作为未作处理的对照。采用PAS染色及免疫组织化学方法,对上述四组小鼠结膜上皮细胞中的杯状细胞及caspase-3、Bax和bcl-2等相关基因蛋白的表达进行检测。
结果:杯状细胞的数目在正常组结膜上皮为52.3±2.3,在干眼+CsA组为50.8±5.2,在干眼对照组27.3±2.3,在干眼+载体组为25.0±1.8,与正常组和接受CsA治疗的鼠相比,结膜的上皮杯状细胞的数目在干眼对照组和干眼鼠+载体组中明显下降,(P均<0.01);干眼对照组和干眼+载体组的结膜上皮杯状细胞的数量无显著性差异,正常组和干眼+CsA组的结膜上皮杯状细胞的数目亦无明显差别。干眼封照组和干眼+载体组结膜上皮细胞中caspase-3及Bax阳性表达的细胞数均明显高于正常组和干眼+CsA组,(P均<0.01),与杯状细胞数目成负相关(干眼对照组,r=-0.72,-0.83;P<0.05.干眼+载体组,r=-0.69,-0.77;P<0.05),干眼封照组和干眼+载体组结膜上皮细胞中bcl-2阳性表达的细胞数明显低于正常组和干眼+CsA组(两组均为P<0.01)与杯状细胞数目成正相关(干眼对照组r=0.78,P<0.01,干眼+载体组r=0.71,P<0.01)
结论:局部使用CsA能够大大地减少结膜上皮细胞的凋亡,防止结膜干燥症鼠杯状细胞的丢失。CsA治疗结膜干燥症的主要机制在于抑制细胞凋亡。