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热应激对奶牛的健康造成巨大伤害,并且降低奶牛生产性能,给生产带来严重损失。热应激蛋白70(HSP70)作为分子伴侣,在奶牛发生热应激时能保护机体免受或减轻伤害。本文以温湿指数(THI)作为参照指标,比较中国荷斯坦奶牛热应激期和非热应激期生理常数、血液生化指标及生产性能变化。采用PCR-SSCP检测HSP70-1基因单核苷酸多态性,使用Western-blot方法检测奶牛热应激时淋巴细胞HSP70蛋白表达水平。通过SPSS软件对SNPs与HSP70表达水平、生理常数、血清生化指标及生产性能进行关联分析。实验一。从福建长富某牛场核心群随机选择458头中国荷斯坦泌乳牛进行实验,分别于非热应激期(2013年11月至2014年1月)和热应激期(2014年7月至9月)期间,测定牛舍温湿指数(THI)、奶牛生理常数、血清生化指标及生产性能。结果表明:处于中度热应激时,奶牛直肠温显著升高(P<0.05),呼吸频率极显著加快(P<0.01);血清T4和Cor浓度分别下降23.80%(P<0.01)和36.20%(P<0.01),血清T3和INS浓度下降,但差异均不显著(P>0.05);血清Glu下降25.50%(P<0.01),血清BUN浓度升高32.14%(P<0.01),血清TG浓度没有显著变化;产奶量、乳蛋白率和乳脂率分别下降了17.75%(P<0.05)、5%(P<0.05)和23%(P<0.01)。实验二。采用PCR-SSCP疗法,检测458头处于泌乳期中国荷斯坦奶牛的HSP70-1基因单核苷酸多态性,与耐性能进行关联分析。根据CNKI登录号为AY149619的HSP70-1基因,使用primer 5.0设计12对引物。结果发现:在HSP70-1基因1112位点发生了C-A突变,有AA、AB及BB 3种基因型;3390位点发生T-C突变,有CC、CD及DD 3种基因型;4583位点发生T-C突变,有EE和EF 2种基因型;5886位点A碱基缺失,有HH和HI 2种基因型。采用Western-blot结合光密度分析检测奶牛HSP70表达水平。使用SPSS软件建立一般线性模型,对SNPs与生理常数、血清生化指标、HSP70表达水平及生产性能进行关联分析。结果表明:C1112A位点与HSP70表达水平、直肠温度、产奶量、体细胞数显著相关。其中:AB及AA型个体直肠温度显著低于BB型个体(P<0.05);AB型个体血清T3浓度显著低于AA和BB个体(P<0.05),T4浓度显著低于BB个体(P<0.05)低于AA个体,但差异不显著(P>0.05);AB型个体HSP70蛋白表达量显著高于AA、BB型个体(P<0.05);AB型个体热应期产奶量显著高于AA、BB型个体(P<0.05),分别高了9%和13%;AB型个体乳体细胞数显著低于AA和BB型个体(P<0.05)。T3390C位点与乳脂率显著相关(P<0.05),其中DD型个体显著高于CC型和CD型个体(P<0.05)。其他位点与生产性能均不相关。可见,AB型为耐热基因型,可作为奶牛耐热基因的分子遗传参考标记。