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目的:通过建立柴油机尾气颗粒物染毒小鼠动物模型,观察、分析柴油机尾气颗粒物(DEP)对卵母细胞发育进程的影响,初步阐明其作用机理,评价柴油机尾气颗粒物所致雌性生殖毒性的情况:在确定柴油机尾气颗粒物导致小鼠卵母细胞损伤的基础上,展开关于复方当归注射液对其可能的防治作用及作用机制研究,为中药制剂在生殖功能保护方面的临床应用提供理论依据,促进中医药的推广应用。方法:以273只21天龄健康ICR小雌鼠为研究对象。分13组,除空白对照组和空白治疗组外,DEP模型组(分为低、中、高剂量三个浓度)、DEP模型对照治疗组(DEP中、高剂量)、中剂量模型+中药低剂量组、中剂量模型+中药中剂量组、中剂量模型+中药高剂量组、高剂量模型+中药低剂量组、高剂量模型+中药中剂量组、高剂量模型+中药高剂量组共11组。自21天龄至31天龄采用移液枪向小雌鼠咽后壁滴入柴油机尾气颗粒物(俄亥俄州立大学公共卫生学院提供,已知主要成分和粒径大小)悬浊液,每三天一次,共10天。对于中药治疗组,在染毒后分别对治疗组腹腔注射5g生药/kg·d、10g生药/kg·d和20g生药/kg·d复方当归注射液,空白治疗组、DEP模型对照治疗组(DEP中、高剂量)腹腔注射生理盐水0.3ml/10g·d。观察小鼠的一般情况、体重增长情况、卵巢湿重以及脏器系数;电镜下观察小鼠卵母细胞超微结构;测定卵巢组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量;采用卵母细胞体内成熟、体外受精的方法观察DEP对小鼠卵母细胞成熟的影响;应用实时PCR技术检测卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)成分情况。结果:模型组:1.各组间小鼠体重变化无统计学差异(P＞0.05)。卵巢湿重及卵巢脏器系数DEP的中、高剂量染毒组与对照组、DEP的低剂量组比较有显著降低(P＜0.05);2.电镜下观察可见:DEP的中、高剂量染毒组卵母细胞大部分线粒体肿胀及空泡化,而DEP的低剂量组卵母细胞结构无改变;3.DEP的中、高剂量染毒组小鼠卵巢组织中SOD含量、GSH含量显著降低,MDA含量显著升高(P＜0.05);4.各染毒组对卵母细胞生发泡破裂没有影响,DEP的中、高剂量染毒组均可以明显地降低小鼠体内(0h)卵母细胞第一极体释放率(P＜0.01)及增高卵母细胞退化率(P＜0.01)。在受精24h后总体外受精率和培养48h后2-细胞以上胚胎卵裂率与对照组、DEP的低剂量组相比下降极显著(P＜0.01);5.与对照组比较,DEP3.0ug/ul组和DEP12.0ug/ul组小鼠卵母细胞mtDNA的拷贝数(转化成对数后)与对照组、DEP0.8ug/ul组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。复方当归中药治疗组:DEP染毒的小鼠上述情况均有不同程度改善,具体表现为:1.各组间小鼠体重变化无统计学差异(P＞0.05)。复方当归高剂量治疗组的卵巢湿重及卵巢脏器系数与相应剂量DEP的模型组比较有显著升高(P＞0.01);2.电镜下观察可见:复方当归高剂量治疗组卵母细胞大部分线粒体肿胀及空泡化程度有所改善;3.复方当归高剂量治疗组小鼠卵巢组织中SOD含量、GSH含量显著升高,MDA含量显著降低(P＜0.05);4.各染毒组对卵母细胞生发泡破裂没有影响,复方当归高剂量治疗组均可以明显地增加小鼠体内(0h)卵母细胞第一极体释放率(P＜0.01)及降低卵母细胞退化率(P＜0.01)。在受精24h后总体外受精率和培养48h后2-细胞以上胚胎卵裂率与相应剂量DEP的模型组相比升高极显著(P＜0.01);5.小鼠卵母细胞mtDNA的拷贝数(转化成对数后),复方当归高剂量治疗组与相应剂量DEP的模型组相比,差异有统计学意义(P＜0.01)。结论:1.本研究成功制作急性接触柴油机尾气颗粒损伤动物模型,有利于研究DEP、复方当归注射液对女性生殖系统的作用。2.DEP具有生殖毒性,可对卵巢及卵母细胞均造成不同程度的损伤;同时小鼠体外受精情况随DEP的含量的增加而减少,由此可推断DEP暴露对受孕有一定危害作用。3.从中医病因学来看,DEP这种环境污染致病因素可以看作一种“外邪”,作为一种致病因子直接损伤个体,造成脏腑生理功能的紊乱和脏腑气血的失调,损及冲任,导致生殖功能障碍。4.中药能干预DEP的毒性,复方当归注射能对DEP所造成小鼠内生殖器和卵母细胞的损伤有一定的拮抗和缓解作用,达到“扶正驱邪”的效果。由此推断在DEP暴露的防治中适当应用复方当归注射液具有一定可行性,为中药制剂在生殖功能保护方面的临床应用提供理论依据,促进中医药的推广应用。