大孔环糊精介质的制备及用于大豆异黄酮的分离纯化

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层析是目前广泛应用的一种分离纯化技术,层析介质是层析技术的关键要素之一,直接影响着分离过程的传质效率和分离效果。环糊精由于具有“内疏水、外亲水”的特殊结构而受到广泛关注,外部亲水的羟基基团可以通过化学修饰的方法合成功能性衍生物,疏水的空腔可以和无机物及有机物小分子形成包结复合物,譬如从天然植物中分离提取黄酮或异黄酮等。由于环糊精在形成聚合物之后,其疏水空腔得以保留,所以,基于环糊精空腔包结特性的环糊精聚合物一直是人们的研究热点,在环保、医药、食品、层析等领域均有应用。本文围绕环糊精介质的制备、性质和应用等内容展开,通过对介质吸附性能的比较,选择了吸附性能较佳的介质用于大豆异黄酮的分离纯化。首先,我们以环氧氯丙烷为交联剂,通过β-环糊精的溶解、交联、反相悬浮成球、固化等一系列步骤,并采用控制碳酸钙(碳化钨)颗粒添加量的方法,制备得到一系列环糊精聚合物(CDP)微球。考察了碳酸钙用量和转速对微球制备的影响,并优化了制备条件。对环糊精微球性质进行了表征,重点考察了碳酸钙用量对微球主要物性的影响。实验发现,微球具有良好球形度,粒径分布符合对数正态分布,平均粒径在200μm以下,扩孔微球的平均粒径大于未加的,扩孔微球的含水率、孔度和孔容均高于未扩孔的,湿真密度略有降低,说明碳酸钙的使用可以扩大微球的孔道。其次,我们以芦丁为模型化合物,考察了所制备的环糊精介质对芦丁的静态吸附、动态吸附及穿透行为和影响吸附的因素,利用Langmuir吸附等温方程和孔扩散模型分别对静态吸附和吸附动力学数据进行拟合。结果表明,介质对芦丁的吸附行为符合Langmuir方程,扩孔介质对芦丁的静态饱和吸附量比未扩孔的和添加碳化钨的介质高,且吸附量随温度和溶液pH的升高而减小。扩孔介质的有效孔扩散系数De约是未扩孔和添加碳化钨的介质的3倍,对芦丁的动态吸附量比未扩孔的和添加碳化钨的介质均高。再次,在了解介质吸附性能的基础上,对CD-Ca3介质进行应用尝试,以固定床模式分离纯化大豆异黄酮。将大豆异黄酮粗品制备的原料液处理后上柱,经水洗、乙醇洗脱等步骤得到分离纯化产物,其中大豆异黄酮的纯度可达93.39%,回收率可达87.11%,实现了大豆异黄酮的高效纯化。CD-Ca3介质表现出色,是一种适用于异黄酮类天然产物分离纯化的优良介质,具有良好的应用前景。
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