表没食子儿茶素没食子酸酯纳米脂质体的制备及其对鳕鱼保鲜效果的研究

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表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)虽然具有广泛的生物学功能,但是当其暴露在空气中很容易被氧化,失去活性,导致EGCG的应用受到极大的限制。纳米脂质体由磷脂双分子层组成,可以阻断外面的溶液进入内部,能保护载药,提高载药稳定性和生物利用率。本实验采用纳米脂质技术,将EGCG制备成EGCG纳米脂质体,研究最佳的制备方案,评估稳定性,并研究EGCG纳米脂质体的生物学功能,最后探索其对鳕鱼的保鲜效果。具体结果如下:(1)采用逆向蒸发法制备EGCG纳米脂质体,结合单因素实验和响应面法,获得最优的制备方案:脂胆比为4,EGCG浓度为4.88 mg/m L,吐温-80浓度为1.08%,旋蒸温度为34.5℃。此时,所得的包封率最高,为85.79%±1.65%,粒径较小,为180.2 nm±4.3 nm。(2)研究了不同的外界环境对EGCG纳米脂质体泄漏率和粒径的影响,来探索其稳定性。结果证明,高温和酸性环境对脂质体的稳定性影响较大,应尽量避免接触。超声时间增加会导致泄漏率上升,但同时会降低粒径,应控制好超声时间。模拟胃肠液实验表明,纳米脂质体能保护EGCG免受胃蛋白酶等的破坏,EGCG纳米脂质体稳定性处于可接受水平。最后,研究EGCG纳米脂质体膜的氧化程度,30天内氧化不明显,结构较稳定。(3)通过抗氧化、抗菌、抗癌三个实验,探索了EGCG纳米脂质体的生物学功能。在对海白虾的氧化研究中,EGCG纳米脂质体有效的减缓了MDA值的增加,有明显的抗氧化作用;通过抑菌试验,证明了其对腐败菌和致病菌有较好的抑制作用;采用MTT法和AO/EB法对NCI-N87胃癌细胞抑制作用的研究中,证明了EGCG纳米脂质体有抗癌作用,且效果优于EGCG。(4)从化学(p H、MDA、TVB-N)、物理(感官评价)、生物(菌落总数)三个角度研究EGCG纳米脂质体对鳕鱼(Gadus macrocephalus)的保鲜作用。实验表明,EGCG纳米脂质体能有效的减缓鳕鱼p H、MDA、TVB-N值的增加,减慢了鳕鱼感官性状变坏的速度,抑制细菌的繁殖。较EGCG,EGCG纳米脂质体对鳕鱼的保鲜效果更加明显。最后制备了EGCG纳米脂质体可食用膜,初步验证了可食用膜在抑菌效果上的优势,为未来发展可食用保鲜膜做了探索。
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