质粒pUDK-HGF一般要求低温状态下保存,对温度敏感不利于药物的存储、运输和应用;且有效成分在溶液中不稳定,浓度较低,不能高浓度使用。本文旨在利用甘露醇、蔗糖等保护剂加入pUDK-HGF溶液中通过真空冷冻干燥和喷雾干燥等方法制备成流动性好、吸湿率低、稳定性良好的固体剂型,使得pUDK-HGF的完整性不会被破坏,通过细胞实验、动物实验、以及加速实验对固体剂型pUDK-HGF的完整性和稳定性进行测定分析,本文主要研究结果如下:(1)制备重组质粒pUDK-HGF,其生产工艺包括:菌体的发酵,裂解,浓缩,纯化等一系列的工艺,可获得纯度较高的重组质粒pUDK-HGF。(2)冷冻干燥通过对高超螺旋比例和较低的吸湿性的筛选,确定甘露醇+蔗糖(16+4)mg/m L的优选配方。加速实验表明:4℃和-20℃条件下,保存6个月样品的超螺旋比例基本不会降低,40℃和25℃条件下,可以保存2个月,两个月以后,温度越高超螺旋比例断裂程度越大。(3)喷雾干燥通过对样品吸湿性的测定,结果表明:质粒含量越高,吸湿率越高,四种样品流动性的测定结果显示均符合生产要求,加速实验表明:4℃和-20℃条件下,保存6个月样品的超螺旋比例有轻微降低,40℃和25℃条件下,保存6个月的样品,(甘露醇:蔗糖=4:1):质粒=50:1的断裂程度最小。(4)液体剂型和喷雾干燥后的pce-EGFP(携带荧光素酶、且和pUDK-HGF有类似的结构)都可以对293T细胞进行转染,且相同剂量条件下,两者的表达量基本一样。pUDK-HGF对细胞的迁移具有促进作用,用50 ng/m L pUDK-HGF处理后的细胞间迁移得更快。建立小鼠背部创伤模型,结果发现,喷雾干燥后的pUDK-HGF能促进对小鼠创伤的愈合,适当的剂量促进表达效果更佳,浓度过高可能会在一定时间内使表达受阻,给药剂量4 mg效果最好,约为400μg/cm~2。