产几丁质酶木霉菌菌株筛选及特性的研究

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采集云南省玉溪、文山、大理、丽江、楚雄、遵义等6市土样49份,分离纯化木霉菌,获得118个菌株.对稀释平板法、直接稀释法、诱捕法进行了比较,结果表明直接稀释法和诱捕法分离木霉菌的效果较好,诱捕法的效果最好,易于获得目的菌株.与稀释平板法比较,直接稀释法和诱捕法尤其适用于处理大批量的土样.首次采用还原糖法测定木霉菌产几丁质酶特性.在以几丁质酶的底物--几丁质(胶状几丁质)为唯一碳源的液体培养基中进行木霉菌发酵培养,发酵上清液与胶态几丁质37℃保温30min后与3,5-二硝基水杨酸试剂在100℃水浴中反应,以反应后颜色的变化,确定发酵液中几丁质酶的有无及数量.与常规采用的透明圈法相比,还原糖法较为直观、准确.应用还原糖法进行产几丁质酶木霉菌的筛选,关键在于发酵上清液中没有还原糖,即所有发酵上清液与DNS反应都没有颜色变化;这样只需比较发酵上清液和胶态几丁质混合保温后与DNS反应颜色的变化,即可确定发酵上清液中有无几丁质酶存在,辨别反应颜色的变化,比在半透明平板上辨别透明圈容易.
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