实验目的： 通过检测CD4+、CD8+T细胞和CD34在外阴上皮内非瘤样病变中的表达情况，探讨细胞免疫和微循环障碍与外阴上皮内非瘤样病变发生的关系。 实验方法： 一、材料 收集中国医科大学附属第一医院妇科手术病人石蜡组织标本，分别取外阴鳞状上皮细胞增生20例、外阴硬化性苔藓20例，外阴正常皮肤10例。以上标本均经病理证实。 二、试剂 鼠抗人单克隆抗体CD4，兔抗人单克隆抗体CD8，鼠抗人单克隆抗体CD34，S-P超敏试剂盒。均购于福州迈新生物科技有限公司。 三、免疫组化检测 采用免疫组化S-P法分别检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD34在20例外阴鳞状上皮细胞增生、20例外阴硬化性苔藓病变中的表达，取10例外阴正常皮肤作对照。 四、结果判定 CD4蛋白阳性染色定位于细胞膜/浆、CD8蛋白阳性染色定位于细胞膜/浆，阳性细胞染色程度均为明显的棕黄或棕褐色，多分布于真皮层。每张切片选取真皮层内5个不同视野，计算同一张切片的平均光密度值，其代表阳性染色细胞在该组织中的表达水平。CD34蛋白主要定位于细胞浆中，少数在细胞膜亦有表达。表现为棕黄至棕褐色颗粒，阳性标准按weidner等方法检测，在高倍镜视野范围内计数所有染色的微血管。取3个视野计数结果的均数为该切片的微血管数，即MVD值(微血管密度microvesseldensitymeasurements，MVD)。 五、统计学分析 利用SPSS12.0统计分析软件，各组计量资料的结果进行t检验，p＜0.05有统计学意义。 实验结果： CD4+T细胞在外阴鳞状上皮细胞增生和外阴硬化性苔藓中侵润均明显低于正常皮肤(P＜0.05)。CD8+T细胞在外阴硬化性苔藓病变组织中侵润明显高于正常皮肤和外阴鳞状上皮细胞增生，差异具有显著性(P＜0.05)。CD34标记的微血管数目在外阴鳞状上皮细胞增生中较外阴正常皮肤稍增多，两者相比无显著性差异(P＞0.05)；在外阴硬化性苔藓中微血管数目明显减少，与正常皮肤相比两者有显著性差异，(P＜0.05)。 结论： 1、外阴鳞状上皮细胞增生真皮内细胞免疫无明显增强，微血管的数目无明显增加，微血管的扩张与炎细胞浸润有关。 2、外阴硬化性苔藓病变组织内存在免疫应答过度，造成局部组织细胞的破坏，进一步证明外阴硬化性苔藓可能是一种自身免疫性疾病。晚期胶原纤维增生且发生玻璃样变可能与微血管破坏有关。