小鼠卵子突变基因的修饰基因发现和定位

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:rghaijun23
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自20世纪初,小鼠的遗传学研究从宠物农场进入哈佛大学的实验室只有短短一百年的历史;但是,由于小鼠基因组与人类基因组高度同源、小鼠基因组改造手段非常成熟以及小鼠近交系、突变系和工具小鼠品系种类繁多,小鼠遗传学已成为发育生物学、功能基因组学和疾病机理研究的核心研究领域,小鼠也成为最重要的模式生物之一。 近交系小鼠DDK具有一种奇异的、极性不予的繁殖特性,亦称DDK综合症。这种极性不育的特性是由于DDK卵子细胞质物质和其它品系精子因子之间存在的一种不亲和性引起的,它们二者均受到位于小鼠第11条染色体的卵子突变(Ovum Mutan或Om)位点上的1对等位基因所控制。近年来,赵卫东老师发现B6遗传背景中存在着卵子突变基因的修饰基因,这些修饰基因使Om位点杂合型的雌鼠胚胎死亡率随着其B6背景基因频率的增加而升高。同时,也有学者采用不同的方法和手段先后发现和报道了Om修饰基因的存在,但在修饰基因的数目多少和表达方式上,存在着不同的认识。 本研究旨在探明B6小鼠品系中存在的Om修饰基因的数目及其在染色体上的方位,为研究修饰基因的作用方式打下基础。在赵卫东老师前期收集164个样本的基础上进一步加大样本的数量,并在已经存在修饰基因的染色体区段筛选微卫星引物,进行修饰基因的精细定位,为以后的基因克隆以及探明其作用方式和作用机理打下基础,实验结果如下: 1.微卫星引物的筛选:我们分别在第9和14条染色体上各随机挑选50和30对引物,共筛选出有多态性的引物8对,其中第9条染色体上有3对(D9Mitl28、D9Mit140、D9Mit318),第14条染色体上有5对(D14Mit14、D14Mitl29、D14Mit59、D14Mit35、D14Mit50)。 2.连锁分析:我们运用winQTLcart软件对48个样本进行了复合区间作图分析,在第10条染色体上发现胚胎着床数和存活胎仔数的QTLs,其LOD值分别为0.8和3.2。另外,在第5、6、9和14条染色体上也可能存在OTLs它们的L,0D值均达到1. 5以上,此结果与赵卫东的定位结果吻合。另外,我们通过增加微卫星引物的方法,将修饰基因9定位在D9Mit27和D9Mit318之间大约16cM。
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