细胞催化法制备5’-肌苷酸二钠提纯工艺研究

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5’-肌苷酸二钠属于核苷类化合物,5’-肌苷酸二钠(简称5’-肌苷酸、IMP)和5’-鸟苷酸二钠(简称5’-鸟苷酸、GMP)组成的呈味核苷酸二钠(简称呈味核苷酸、I+G)是核苷酸类食品增鲜剂,具有呈味作用,与味精混合时会产生协同作用,其鲜度可以提高数十倍。采用酸性磷酸酶催化肌苷转化为5’-肌苷酸二钠的细胞催化合成法与化学合成法相比,具有反应条件温和、酶专一性强、安全环保等优点,受到国内外科研工作者的广泛关注。本文利用现代生化分离技术,对细胞催化法制备的5’-肌苷酸二钠反应液的提纯工艺进行了系统的研究。研究结果可为细胞催化法制备的5’-肌苷酸二钠反应液的提纯工艺提供有益的参考。研究了pH和温度对5’-肌苷酸二钠反应液稳定性的影响。结果表明,反应液在pH偏酸性情况下容易分解,在pH偏碱性情况下比较稳定;在弱碱性条件下,5℃至65℃的温度范围内,反应液中的5’-肌苷酸二钠含量保持稳定。研究了反应液的预处理与固液分离的方法,考察了凝聚、絮凝、加热、调节pH和添加助剂对反应液预处理的效果,考察了采用离心机、陶瓷膜、管式离心机和板框压滤机除去反应液中菌体等固形物的效果。结果表明,采用加热、调节pH和添加助剂的方法预处理反应液,然后进行板框压滤,可以有效进行反应液的固液分离。采用重量法测定了磷酸盐混合物、5’-肌苷酸二钠和肌苷的溶解度,考察了pH、温度对溶解度的影响。采用浊度法测定了磷酸盐混合物和5’-肌苷酸二钠的超溶解度,考察了温度对超溶解度的影响。综合分析了不同pH和温度条件下,溶解度和超溶解度以及介稳区的变化情况。分别对过滤清液中磷酸盐混合物、5’-肌苷酸二钠和肌苷进行了结晶工艺研究,确定了优选结晶工艺条件,按照优选条件进行了中试验证。对5’-肌苷酸二钠结晶产品进行了结构鉴定,按照食品添加剂5’-肌苷酸二钠行业标准QB/T4261-2011,对5’-肌苷酸二钠结晶产品进行了全项检测,结果表明产品完全符合行业标准。
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