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高血压是常见的严重危害人类健康的心血管疾病。肾素-血管紧张素-醛固酮系统和氧化应激在高血压的发病中起重要作用。在氧化应激状态下,增多的活性氧可将天然低密度脂蛋白氧化修饰为氧化性低密度脂蛋白(oxidative low-density lipoprotein, ox-LDL)。血管紧张素II通过其1型受体(AT1R)活化ox-LDL的受体--植物凝集素样氧化性低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1, LOX-1),而LOX-1的活化可以上调AT1R的表达。血管紧张素Ⅱ/AT1R与ox-LDL/LOX-1之间的正反馈调节作用可能是高血压发病的重要因素,LOX-1在其中发挥了关键作用。LOX-1是1997年由Sawamura等首次从牛主动脉内皮细胞中克隆出来的C型外源凝集素家族膜蛋白。它是血管内皮细胞摄取和代谢ox-LDL的主要受体,在前炎症信号、内皮功能紊乱以及动脉硬化中起着重要作用。研究表明,LOX-1介导ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡。本课题在原发性高血压患者探讨血浆可溶性LOX-1的水平变化,并从细胞水平进一步探讨LOX-1在静态压力所致内皮细胞凋亡中的作用及机制。第一章原发性高血压患者血浆可溶性LOX-1水平变化目的：本研究旨在观察原发性高血压患者血浆中可溶性LOX-1的变化。方法：共收集到正常对照标本27例,高血压病例标本62例,高血脂病例标本24例,高血压合并高血脂病例标本56例。采用酶联免疫法检测血浆中ox-LDL及可溶性LOX-1(sLOX-1)的浓度。比较各组病例及正常对照组血浆中ox-LDL和sLOX-1水平变化。结果：高血脂组血浆ox-LDL水平显著高于正常对照组人群(P<0.01),而高血压组血浆ox-LDL水平与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。高血压合并高血脂组血浆ox-LDL水平显著高于高血压组(P<0.01),而与高血脂组比较无显著差异(P＞0.05)。高血压组和高血脂组血浆sLOX-1水平均显著高于正常对照组人群(P<0.01)；高血压合并高血脂组血浆sLOX-1水平显著高于高血压组(P<0.01),而与高血脂组比较无统计学差异(P>0.05)。结论：原发性高血压患者血浆sLOX-1水平升高。第二章LOX-1在静态压力所致内皮细胞凋亡中的作用及机制目的：探讨LOX-1在静态压力诱导的内皮细胞凋亡中的作用及机制。方法：实验分设正常对照组、静态压力处理组、静态压力+LOX-1中和抗体组、静态压力+NADPH氧化酶抑制剂DPI组、静态压力+NF-κB抑制剂SN50组、静态压力+溶媒对照组。各药物处理组预先孵育处于对数生长期的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-C)1h,再用静态压力(180mmHg)处理6h。乳酸脱氢酶(LDH)漏出实验检测内皮细胞损伤；流式细胞术检测内皮细胞凋亡；比色法检测内皮细胞Caspase-3活性；荧光法和流式细胞术检测内皮细胞ROS生成；real time PCR检测不同静态压力(0,80,120,140,160,180mmHg)处理不同时间(4,6h),HUVEC-C细胞中LOX-1mRNA表达水平；Western Blot检测HUVEC-C细胞中LOX-1蛋白表达水平。结果：静态压力呈压力和时间依赖性地促进内皮细胞LOX-1mRNA和蛋白表达。与对照组相比,静态压力180mmHg时培养内皮细胞6h增加内皮细胞内LDH漏出(P<0.01),LOX-1中和抗体(TS20,10μg/ml)、DPI (20μmol/L)、SN50(18μmol/L)预处理1h后,可抑制静态压力诱导的内皮细胞损伤(P<0.05)。与对照组相比,静态压力180mmHg时培养内皮细胞6h增加细胞凋亡率和caspase-3活性以及细胞内ROS生成(P<0.05), LOX-1中和抗体(TS20,10μg/ml)、 NADPH抑制剂DPI (20μmol/L)、NP-κB抑制剂SN50(18μmol/L)预处理1h后,可抑制静态压力诱导的内皮细胞凋亡、caspase-3活性升高以及ROS生成(P<0.05)。结论：静态压力诱导HUVEC-C凋亡与LOX-1表达上调有关,其作用机制可能涉及LOX-1-NADPH氧化酶-ROS-NF-KB-Caspase-3途径。