【摘 要】
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该实验采用Microcon100纯化蚊媒粗提DNA等方法对实验室感染马来丝虫的中华按蚊进行扩增检测.应用PCR对丝虫蚊媒进行检测时处理蚊体内DNA扩增抑制物是关键因素之一.该实验先用
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该实验采用Microcon100纯化蚊媒粗提DNA等方法对实验室感染马来丝虫的中华按蚊进行扩增检测.应用PCR对丝虫蚊媒进行检测时处理蚊体内DNA扩增抑制物是关键因素之一.该实验先用蚊媒粗提DNA及用去离子水稀释的蚊媒DNA模板,进行PCR及套式PCR(Nested-PCR),均未得到特异条带.而将幼丝虫从蚊体中分离出后再以任一引物扩增,均可见条带.说明蚊媒粗提物中确有抑DNA扩增的物质存在.去离子水稀释亦不能扩增出特异条带.其他抒道的采用Sephadex G-50过滤、探针杂交等去除抑制物的方法,不仅材料昂贵,而且易损失本已微量的样品DNA,故难以推广.该实验首次采用Microcon100纯化蚊媒粗提DNA,以此纯化的蚊媒DNA为模板进行PCR,即可检测出特异性条带.经反复摸索,该检测体系具有较好的重复性,且较其他技术(如探针等)具有敏感性高、操作简单、易掌等优点,故此方法为马来丝虫蚊媒监测工作提供了一种新的检测手段,有较好的应用前景.
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