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目的：用t-BHP(三丁基过氧化氢，tert-butylhydroperoxide)诱导WI-38细胞衰老，建立体外细胞衰老的模型，并研究人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)对t-BHP诱导的细胞衰老的保护作用及可能的线粒体调控机制。 方法：用t-BHP 100μmol／L作用WI-38细胞，从第30代的培养细胞开始，隔代作用1次，每次1h，共4次，诱导细胞衰老。从光镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构的变化；流式细胞术分析细胞周期，计算G1期细胞的比例；SA-β-半乳糖苷酶的细胞化学染色，确定成功建立体外细胞衰老的模型。然后，将WI-38细胞随机分成4组，用不同剂量的人参皂苷Rg1处理模型细胞，比较不同剂量的Rg1对模型细胞中衰老指征的影响，并探讨对细胞内ATP、线粒体膜电位的变化有无改善作用，同时通过测定线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ的活性变化以探讨Rg1延缓衰老的可能分子机制。 结果：100μmol／Lt-BHP作用4次后，WI-38细胞出现衰老的特征，细胞增殖分裂停止，细胞体积增大、胞体变平、次级溶酶体增多，线粒体肿胀，同时G1期细胞比例增加，β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加，提示t-BHP能有效地诱导细胞衰老，可用于建立体外细胞衰老模型，而10μmol／L人参皂苷Rg1能明显地对抗WI-38细胞的这种改变，具有肯定的抗衰老作用。同时研究证实经t-BHP作用后，WI-38细胞中的线粒体膜电位有下降趋势，ATP产量减少，呼吸链复合物Ⅳ的活性降低，提示t-BHP可能通过对呼吸链复合物Ⅳ的氧化损伤作用诱导细胞衰老；而经不同浓度人参皂苷Rg1处理后线粒体膜电位有提高趋势，ATP水平和呼吸链复合物Ⅳ的活性则显著增高，尤其以10μmol／L人参皂苷Rg1的改善作用最为明显。提示人参皂苷Rg1可能主要通过提高线粒体呼吸链复合物Ⅳ的活性来提高ATP产量，从而对抗t-BHP诱导的线粒体损害，发挥延缓t-BHP诱导的细胞衰老作用。 结论：