研究背景和目的：IL-27是一种异质二聚体细胞因子，它由IL-27p28链和EBI3组成，是IL-6/IL-12细胞因子超家族成员，主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及小胶质细胞等分泌。IL-27R是由gp130和IL-27Rα组成的异源二聚体。IL-27与gp130/IL-27Rα复合物结合后通过激活JAK/STAT信号通路进行信号传导，主要涉及STAT1和STAT3磷酸化。IL-27已被报道为肿瘤抑制因子，在多种癌症中发挥显著作用，如抑制肿瘤生长、侵袭、转移、促进细胞死亡等。MicroRNAs(miRNAs)是一种长度约为20-25个核苷酸的非编码小RNA，在各种生物过程中发挥着关键作用，且在不同来源的癌症中具有双重作用。因此，本研究首先探讨IL-27在体外对非小细胞肺癌H1299细胞的增殖、侵袭以及迁移能力的影响，随后再探讨miR-935与IL-27的关系，以期探索miR-935通过调节IL-27进而对H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。
　　研究方法：收集非小细胞肺癌患者的肿瘤组织和邻近正常肺组织标本，采用实时定量PCR技术分别检测组织中IL-27mRNA表达水平。通过CCK8实验检测IL-27对H1299细胞增殖能力的影响；此外还通过集落形成试验来评估IL-27对H1299细胞增殖能力的影响。采用Transwell侵袭试验评价IL-27表达水对H1299细胞侵袭能力的影响。采用划痕试验来模拟体内细胞迁移的过程，进而阐明IL-27对H1299细胞迁移能力的影响。我们通过检测miR-935在非小细胞肺癌组织中的表达进而明确miR-935与IL-27水平的关系。将H1299细胞转染miR-935或经IL-27处理进行细胞存活试验，分别采用CCK8实验、划痕试验、Transwell侵袭试验以评价MiR-935通过IL-27对H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。
　　研究结果：在76对非小细胞肺癌组织样本中IL-27mRNA总体平均表达水平显著低于癌旁正常组织的平均表达水平(p＜0.01)。6株非小细胞肺癌细胞系(HCC827,SPAC1，H1299, H1650, A549, H520)IL-27mRNA和IL-27表达水平均显著低于正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)。IL-27在体外对H1299细胞增殖、侵袭、迁移能力影响研究结果提示：IL-27组(经10ng/mLIL-27处理)H1299细胞在1d、3d、5d的吸光度较对照组明显降低(P＜0.01)，提示IL-27可以显著抑制H1299细胞的增值能力；IL-27组的集落形成率明显低于对照组(P＜0.01)；在H1299细胞中对照组相对侵袭率为100%，IL-27组相对侵袭率为38.8%，IL-27组侵袭率显著低于对照组(P＜0.01)；划痕实验提示：在H1299细胞中IL-27组创面宽度显著大于对照组。miR-935在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于相邻正常组织，同时非小细胞肺癌中miR-935与IL-27水平呈负相关。我们通过PicTar和TargetScan软件预测得出miR-935与靶基因IL-27的3’-UTR结合位点，miR-935过表达显著降低了H1299细胞野生型IL-273-UTR荧光素酶活性，但对突变型IL-273UTR的荧光素酶活性则无明显影响。我们将H1299细胞转染miR-935或经IL-27处理进行细胞增殖、侵袭以及迁移实验结果提示：miR-935过表达能促进H1299细胞的增值，而在此基础上加入IL-27后则可以抑制H1299细胞的增殖；采用划痕试验来模拟体内细胞迁移的过程，结果表明，miR-935逆转了IL-27在H1299细胞中诱导的迁移抑制；采用Transwell侵袭试验来评价miR-935对H1299细胞侵袭能力的影响，结果表明，miR-935逆转了IL-27在H1299细胞中诱导的侵袭抑制。
　　研究结论：IL-27在体外能显著抑制H1299细胞的生长、侵袭以及迁移能力，miR-935在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于相邻正常组织，同时与IL-27表达水平呈负相关，提示miR-935在非小细胞肺癌中能负调控IL-27的表达。miR-935通过负调节IL-27从而促进H1299细胞增殖、侵袭和迁移。本研究中的数据阐明了miR-935作为一种肿瘤相关miRNAs在非小细胞肺癌中能调节IL-27的表达。从而表明，抑制miR-935的表达可能为非小细胞肺癌的治疗提供新的实验依据。