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胰腺为人体重要的器官,兼有外分泌和内分泌的功能。其外分泌的产物胰酶是重要的食物水解酶。目前大多数的胰腺疾病都会引起胰腺外分泌功能的改变,因而机体如何调节胰腺外分泌液备受重视。目前对于胰腺外分泌的研究认为:胰腺外分泌由体液因素和神经因素共同调节,且两者间有相互的作用。进一步研究发现CCK、促胰液素和许多物质对胰腺外分泌的调节均与乙酰胆碱能神经有着密切的关系,因此对于胰腺外分泌的神经调节的研究是非常必要的。而在胰腺外分泌的神经调控中,迷走神经和迷走神经背核起到了重要的作用,因此本项研究主要就针对这二者进行胰腺外分泌的神经传递机制的研究。 1.肠道灌注5-HT后迷走神经节c-Fos、谷氨酸受体、P物质受体的表达 目的:本部分实验主要探讨生理状态下,大鼠十二指肠受到不同灌注刺激后,迷走神经节神经元的活动性。方法:实验分四组:假手术,灌注去离子水,灌注5%的NaCl,灌注10-4mol/L的5-HT,每组10只,在十二指肠内恒流灌注相同时间,假手术组不灌注,然后对迷走神经节切片进行c-Fos免疫组化染色,和c-Fos-NK1-R和c-Fos-NMDA-R2ab双重免疫组化染色,统计分析。结果:灌注5%的NaCl和灌注10-4mol/L的5-HT组的迷走神经节切片出现显著的c-Fos阳性结果,并且伴有NK1-R、NMDA-R2ab的大量表达。结论:在大鼠十二指肠的灌注中,5%的NaCl和10-4mol/L的5-HT可以将迷走神经通路上传到迷走神经节,并且表达谷氨酸和P物质受体。 2.迷走神经背核(DMN)逆向追踪研究 目的:本部分实验主要探讨生理状态下,胰腺中注射有CTB荧光标记的大鼠十二指肠受到10-4mol/L的5-HT灌注刺激后,迷走神经背核(DMN)的神经元的活动性。方法:实验分三组:A组10只,注射CTB,有灌注;B组1只,注射CTB,无灌注;C组1只,注射生理盐水,有灌注。然后对迷走神经背核的切片进行CTB双重免疫染色,并对c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab的表达进行荧光染色。结果:A组:CTB阳性,c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab均阳性;B组:CTB阴性,其他也为阴性;C组:CTB阴性,其他均为阳性。结论:十二指肠5-HT的灌注,引起胰腺神经元将信号